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實(shí)驗動物造模手冊，科研人員的必備指南

一、動物實(shí)驗基本方法指南1、動物實(shí)驗給藥劑量計算方法2、動物實(shí)驗常用給藥方式1、皮下注射。捏起皮膚，刺入針頭，固定后即可注射2、皮內(nèi)注射。剪掉注射部位動物毛發(fā)，消毒，用皮試針頭緊貼皮膚表層刺入皮內(nèi)，針頭上挑再稍刺入3、肌肉注射。適合不溶于水而混懸狀態(tài)的藥物。選擇肌肉發(fā)達(dá)、無大血管經(jīng)過的部位，如臀部4、腹腔注射。腹部消毒，在左或右側(cè)腹部將針頭刺入皮下，沿皮下向前推進(jìn)0.5CM，針頭與皮膚45度角方向穿過腹肌刺入腹腔，此時應(yīng)有落空感，回抽無腸液、尿液后，緩緩?fù)迫胨帯?/p>

干貨分享丨細(xì)胞培養(yǎng)簡單攻略-復(fù)蘇/傳代/凍存

細(xì)胞培養(yǎng)是指將細(xì)胞從動物或植物體內(nèi)取出，然后在適宜的人工環(huán)境中生長的過程。細(xì)胞可以在培養(yǎng)前直接從組織中取出并通過酶或機(jī)械方法進(jìn)行解離，也可以來源于已建立的細(xì)胞系或細(xì)胞株。細(xì)胞培養(yǎng)又具體分為細(xì)胞傳代、換液、凍存、復(fù)蘇等一系列過程，每個步驟都對應(yīng)著不同的操作技術(shù)要點(diǎn)，想要養(yǎng)好細(xì)胞，每一步都必須掌握。1. 細(xì)胞復(fù)蘇細(xì)胞復(fù)蘇是指將休眠的細(xì)胞重新活化，使之重新生長，分裂產(chǎn)生子細(xì)胞的過程。復(fù)蘇后的細(xì)胞可重新進(jìn)入細(xì)胞周期，獲得細(xì)胞類型特異的生物學(xué)功能。復(fù)蘇細(xì)胞一般…

文獻(xiàn)解讀 | 新型化合物9d或成對抗化療腎損傷的“護(hù)腎衛(wèi)士”

化療藥物順鉑雖能有效抗擊癌癥，卻常導(dǎo)致急性腎損傷（AKI），這一副作用讓許多患者治療陷入兩難。近日，安徽醫(yī)科大學(xué)團(tuán)隊在《Bioorganic Chemistry》發(fā)表重磅研究，宣布成功合成一種新型丙烯酰胺化合物9d，能通過阻斷關(guān)鍵炎癥通路，顯著保護(hù)腎臟功能，為癌癥患者帶來曙光。為何順鉑會傷腎？科學(xué)家的破題思路化合物9d的三大“護(hù)腎絕招”01強(qiáng)力抗炎在細(xì)胞實(shí)驗中，9d抑制炎癥因子NO的能力是天然成分白藜蘆醇的7倍以上（IC50=1.80 μM vs 13.14 μM），并顯著降低IL-6、TNF-α等炎癥因子水…

國自然熱點(diǎn)接踵而來：銅死亡新起！細(xì)胞也怕重金屬？一探銅死亡的奇妙世界！

在國家自然科學(xué)基金的熱點(diǎn)研究中，銅死亡已經(jīng)成為一個引人注目的焦點(diǎn)。研究表明，通過精確調(diào)控銅離子的濃度，我們可以誘導(dǎo)癌細(xì)胞發(fā)生銅死亡，從而在不傷害正常細(xì)胞的情況下，實(shí)現(xiàn)對癌癥的精準(zhǔn)打擊。銅死亡，是細(xì)胞被銅“玩壞”了的一種獨(dú)特死亡方式。想象一下，細(xì)胞好好地生活著，結(jié)果突然被銅離子“灌醉”，開始走向“生命的深淵”?？茖W(xué)家們最近發(fā)現(xiàn)，銅不僅僅用來制電線、做藝術(shù)品，還是細(xì)胞的“致命毒藥”！而且更有趣的是，癌細(xì)胞對銅有種特別的“迷戀”，簡直像細(xì)胞界的銅控。所…

動物實(shí)驗 ▏糖尿病動物模型構(gòu)建方法

前言糖尿病（Diabetes mellitus,DM）是胰島素抵抗和胰島素缺乏導(dǎo)致的以高血糖為主要特征的代謝絮亂綜合征，易發(fā)生心、腦、腎等并發(fā)癥，典型病例出現(xiàn)多尿、多飲、多食、消瘦等表現(xiàn)，即“三多一少”癥狀。其發(fā)病機(jī)理復(fù)雜，至今尚未完全闡明，目前還沒有根治方法，因此，建立和選擇適當(dāng)?shù)奶悄虿游锬Ｐ蛯τ谔悄虿≈虏∫蛩氐难芯恳约疤悄虿∷幬锖Y選、療效研究等十分重要。一、自發(fā)性動物模型自發(fā)性糖尿病動物模型是指動物未經(jīng)過任何有意識的人工處置，在自然情況下發(fā)生糖尿病的動物模型。…

單細(xì)胞干貨分享系列，單細(xì)胞可以怎么用？滿滿測序、生信分析思路干貨，走過路過不要錯過

單細(xì)胞作為高分文章的主流、國自然的常青樹，2023年發(fā)文1萬+，2024才過半已經(jīng)發(fā)文7700多篇，這么大的發(fā)文量也能印證單細(xì)胞的高熱度和高成文能力，并且單細(xì)胞的應(yīng)用現(xiàn)在也更多樣化：經(jīng)費(fèi)充足的可以用大樣本量單細(xì)胞測序沖擊高分，沒有實(shí)驗條件的可以挖掘公共數(shù)據(jù)做單細(xì)胞分析，想用單細(xì)胞撐一下門面提高點(diǎn)創(chuàng)新性的還能利用一些單細(xì)胞數(shù)據(jù)庫做些簡單分析，淡妝濃抹總相宜，單細(xì)胞怎么用都可以出彩！所以這次小編準(zhǔn)備給朋友們整理一些單細(xì)胞的思路干貨，第一篇先來具體說說單細(xì)胞可以怎么…

高效科研第一步：LB 培養(yǎng)基配制全攻略與避雷指南

LB培養(yǎng)基（Luria-Bertani培養(yǎng)基，也稱為Lysogeny Broth）是一種廣泛應(yīng)用于微生物學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗室的液體或固體培養(yǎng)基，主要用于培養(yǎng)大腸桿菌（*Escherichia coli*）等細(xì)菌。它的配方簡單、營養(yǎng)豐富，能夠支持多種細(xì)菌的快速生長。No.1主要成分LB培養(yǎng)基的經(jīng)典配方包含以下三種核心成分：1. 胰蛋白胨（Tryptone）：10 g/L 提供氮源、氨基酸和小肽，是細(xì)菌生長的主要營養(yǎng)來源。2. 酵母提取物（Yeast Extract）：5 g/L 提供維生素、核苷酸和其他生長因子。3. 氯化鈉（NaCl）：10 g/L…

動物實(shí)驗| 大鼠腦中動脈缺血再灌注模型構(gòu)建方法分享

缺血性腦卒中是一種嚴(yán)重的神經(jīng)系統(tǒng)疾病，其中組織損傷是導(dǎo)致死亡的主要原因。近年來的研究表明，缺血后的再灌注過程中產(chǎn)生的過量氧自由基在組織損傷中起著關(guān)鍵作用。因此，研究腦缺血再灌注損傷的作用機(jī)制已成為全球科學(xué)界的關(guān)注焦點(diǎn)。在眾多研究方法中，線栓法因其操作簡便、無需開顱、無需呼吸機(jī)輔助等優(yōu)點(diǎn)，成為構(gòu)建腦局部缺血再灌注損傷模型的首選方法。該方法能夠精確控制缺血及再灌注的時間，并且對局部條件的控制較為容易，對全身的影響較小，是制作腦局部缺血再灌注損傷模型的…

文獻(xiàn)解讀 | 肝癌治療新曙光：基于二硫鍵死亡相關(guān)長非編碼RNA的預(yù)后標(biāo)志物研究

近期，一項發(fā)表于《Frontiers in Immunology》的研究成果，為肝細(xì)胞癌（Hepatocellular Carcinoma, HCC）的治療帶來了新的希望。該研究由浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬邵逸夫醫(yī)院的Haishui Zheng團(tuán)隊完成，題為“A disulfidptosis-related lncRNA signature for analyzing tumor microenvironment and clinical prognosis in hepatocellular carcinoma”，揭示了二硫鍵死亡（disulfidptosis）相關(guān)長非編碼RNA（lncRNA）在HCC中的預(yù)后價值及潛在治療機(jī)制。No.1研究背景肝細(xì)胞癌（HCC）是全球第六大…

操作不熟？教你流式細(xì)胞術(shù)實(shí)驗從入門到精通！

流式細(xì)胞儀通常配有多個激光器，它們產(chǎn)生特定波長的光。由于每種熒光染料發(fā)出的光通常結(jié)合長通或短通濾光片被帶通濾光片過濾，故流式細(xì)胞儀只檢測特定波長范圍內(nèi)的熒光。在選擇熒光染料時，請確認(rèn)儀器帶有能夠激發(fā)目標(biāo)熒光染料的激光器，以及能夠檢測該染料發(fā)射光的濾光片組合。抗體選擇/多色組合設(shè)計一般來說，在同一樣品上使用的熒光染料越多，從該樣品中收集到的信息也越多。在單個樣品上組合使用多種熒光染料時，設(shè)計需要遵循以下幾點(diǎn)基本建議：<10種顏色1.抗原密度*應(yīng)該與熒光…

【醫(yī)學(xué)】2025年國自然熱點(diǎn)：這些關(guān)鍵詞將引領(lǐng)科研新潮流！

國自然基金一直是醫(yī)學(xué)科研領(lǐng)域的風(fēng)向標(biāo)，其資助方向不僅反映了當(dāng)前醫(yī)學(xué)研究的前沿?zé)狳c(diǎn)，也為科研人員提供了重要的研究思路和方向。2025年，國自然醫(yī)學(xué)領(lǐng)域又將迎來哪些新熱點(diǎn)？如何抓住這些熱點(diǎn)提升立項成功率？本文為你一探究竟！2025年國自然醫(yī)學(xué)領(lǐng)域五大熱點(diǎn)關(guān)鍵詞01免疫調(diào)控：巨噬細(xì)胞與T細(xì)胞的“戰(zhàn)場”免疫學(xué)一直是國自然資助的重點(diǎn)領(lǐng)域，2024年相關(guān)項目中標(biāo)數(shù)遙遙領(lǐng)先，預(yù)計2025年將繼續(xù)成為熱門方向。研究重點(diǎn)包括巨噬細(xì)胞、T細(xì)胞、免疫記憶以及腫瘤免疫治療。這些方向不僅在基…

細(xì)胞培養(yǎng)全攻略：從入門到精通，一篇搞定所有關(guān)鍵技巧！

細(xì)胞培養(yǎng)是生物醫(yī)學(xué)研究的核心技術(shù)之一，廣泛應(yīng)用于藥物篩選、基因功能研究、疾病模型構(gòu)建等領(lǐng)域。然而，細(xì)胞培養(yǎng)看似簡單，實(shí)則暗藏許多“坑”。本文將為你詳細(xì)解析細(xì)胞培養(yǎng)的全流程，從基礎(chǔ)操作到高級技巧，助你輕松掌握細(xì)胞培養(yǎng)的奧秘！細(xì)胞培養(yǎng)的基礎(chǔ)知識01細(xì)胞類型●原代細(xì)胞：直接從組織中分離，生物學(xué)特性接近體內(nèi)狀態(tài)，但壽命有限。●細(xì)胞系：經(jīng)過永生化處理，可無限傳代，但可能發(fā)生遺傳變異?！窀杉?xì)胞：具有自我更新和分化潛能，常用于再生醫(yī)學(xué)研究。02培養(yǎng)條件●培養(yǎng)基：?！?/p>

動物試驗研究方案設(shè)計，具體應(yīng)考慮哪些因素？

眾所周知，無論是在科研課題設(shè)計，還是在藥物臨床前實(shí)驗階段，動物實(shí)驗都扮演者重要的角色，通過動物實(shí)驗我們能夠：1. 確定潛在的作用靶器官和治療作用出現(xiàn)的時間、性質(zhì)、程度及其可逆性；2. 確定臨床監(jiān)測的指標(biāo)和安全性參數(shù)；3. 便于探究疾病潛在作用機(jī)制和相關(guān)信號通路。它的完整性、合理性、論證性直接決定著這個課題或者這個項目的水平。也就是說，在實(shí)驗開始之前，必須把所有細(xì)枝末節(jié)給想清楚（萬一沒整明白，雜志編輯又要你補(bǔ)，就該傻眼了），這里可以讓動物實(shí)驗經(jīng)驗豐富的師兄師…

DeepSeek文獻(xiàn)“瞎編”？用這個方法，秒懂如何有效阻止錯誤生成！

目前，大家在使用問答大模型如DeepSeek、Chatgpt等來寫論文時，會發(fā)現(xiàn)插入的參考文獻(xiàn)打不開或根本不存在的情況；另外DeepSeek、Chatgpt擴(kuò)寫的內(nèi)容如一些流行病學(xué)數(shù)據(jù)無法給出準(zhǔn)確的“出處”，這對于嚴(yán)謹(jǐn)?shù)目蒲袑懽鱽碚f顯然是不夠的。那么，對于這種情況，我們該如何應(yīng)對呢？01痛點(diǎn)觀察大語言模型的固有缺陷主要體現(xiàn)在以下幾個方面：（1）對于未接入專業(yè)文獻(xiàn)數(shù)據(jù)庫的模型而言，其文獻(xiàn)生成過程存在顯著的不確定性，類似于"隨機(jī)抽選"的結(jié)果，難以保證內(nèi)容的準(zhǔn)確性和可靠性。（2…

一文了解什么是免疫共沉淀（Co-IP）實(shí)驗

引言：為什么Co-IP是研究蛋白相互作用的“黃金標(biāo)準(zhǔn)”？在生命科學(xué)領(lǐng)域，蛋白質(zhì)之間的相互作用是調(diào)控細(xì)胞功能的核心機(jī)制之一。無論是信號通路的激活、疾病的發(fā)生，還是藥物的作用靶點(diǎn)，都離不開蛋白質(zhì)的“社交網(wǎng)絡(luò)”。而免疫共沉淀（Co-IP）作為研究蛋白相互作用的經(jīng)典技術(shù)，憑借其高特異性和直觀性，成為實(shí)驗室的必備技能。但很多新手對Co-IP實(shí)驗充滿疑問：?為什么明明做了實(shí)驗，卻檢測不到目標(biāo)蛋白？?對照實(shí)驗到底怎么做才能避免“假陽性”？?如何從一堆復(fù)雜的步驟中抓住關(guān)鍵點(diǎn)？本…

文獻(xiàn)解讀┃Nature Communications：揭示 SH3RF3 促進(jìn)乳腺癌干細(xì)胞特性的機(jī)制

01論文基本信息 標(biāo)題：SH3RF3 promotes breast cancer stem-like properties via JNK activation and PTX3 upregulation期刊：Nature Communications影響因子：17.69作者：Peiyuan Zhang, Yingjie Liu, Cheng Lian 等發(fā)表日期：2020 年 5 月 19 日DOI：10.1038/s41467-020-16051-9關(guān)鍵詞：乳腺癌干細(xì)胞；SH3RF3；JNK 通路；PTX302研究背景 癌癥嚴(yán)重威脅人類健康，腫瘤異質(zhì)性使得癌癥治療面臨挑戰(zhàn)，癌癥干細(xì)胞（CSCs）理論為解釋腫瘤異質(zhì)性提供了思路。乳腺癌干細(xì)胞（BCSCs）在乳腺癌的…

2025年國自然申報即將啟動，這三個必追熱點(diǎn)你要知道！

2024年國家自然科學(xué)基金的評審結(jié)果一經(jīng)公布，多個類別的項目資助率都呈現(xiàn)出持續(xù)下降的趨勢，面上項目和青年基金的批準(zhǔn)率分別為 11.66% 和 15.54%。創(chuàng)下近幾年新低，不少科研人危機(jī)感十足，生怕今年競爭更加激烈。但就目前國自然基金委做出的幾大改革來看，2025年應(yīng)該會持續(xù)擴(kuò)大資助量，“2024是國自然史上最卷的一年，但也可能是未來很長一段時間里最容易的一年”，類似的論調(diào)也被傳得沸沸揚(yáng)揚(yáng)。那么，2025國自然，該如果申報才能提升獲批幾率呢？2025年國家自然科學(xué)基金（NSFC）申報本…

動物行為學(xué) ▏小鼠焦慮行為實(shí)驗怎么做？高架十字迷宮案例操作來啦~

研究小鼠焦慮行為的方法有很多，其中行為學(xué)實(shí)驗之高架十字迷宮任務(wù)是一種評估嚙齒動物類焦慮行為比較經(jīng)典的一種方法。該測試是在具有兩個張開和兩個閉合臂的加號形裝置上進(jìn)行的，正式實(shí)驗開始時，允許動物自由探索迷宮5分鐘，同時記錄進(jìn)入張開和閉合臂的持續(xù)時間和頻率。該任務(wù)基于一種接近—回避沖突，這意味著該動物面臨著探索新環(huán)境的傾向與對高處和開放空間的無條件恐懼之間的斗爭。因此，與對照動物相比，類似焦慮狀態(tài)的特征是張開臂回避增加。設(shè)施準(zhǔn)備1.高架十字迷宮2.工業(yè)相機(jī)（…

科研干貨分享：12種常見的文獻(xiàn)數(shù)據(jù)圖解析

1、免疫熒光圖怎么看？ 結(jié)果解讀：免疫熒光圖通過特定標(biāo)記物的染色來觀察細(xì)胞類型的分布和密度。例如，在實(shí)驗中，使用TAM標(biāo)記物Iba1進(jìn)行免疫熒光染色，發(fā)現(xiàn)敲低WISP1基因能顯著降低膠質(zhì)瘤干細(xì)胞(GSC)來源的異種移植物中TAM的密度，這表明WISP1在腫瘤微環(huán)境中對TAM含量的調(diào)節(jié)作用。2、細(xì)胞凋亡流式圖怎么看？ 結(jié)果解讀：細(xì)胞凋亡流式圖通過流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡的標(biāo)記物，如Annexin V和PI（碘化丙啶）的染色，來評估細(xì)胞凋亡的比例和階段。3、UMAP圖怎么看？ 案例解讀：UMAP（U…

細(xì)胞實(shí)驗技能 | CCK-8實(shí)驗最全操作步驟以及注意事項

CCK-8是一種在細(xì)胞生物學(xué)實(shí)驗中廣泛應(yīng)用的試劑，用于檢測細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性。它可以直接添加到細(xì)胞樣品中，無需預(yù)先配制各種成分。細(xì)胞增殖越快，顏色越深，表明毒性較小；而細(xì)胞毒性越大，則顏色越淺。對于相同的細(xì)胞類型，顏色的深淺（即生成的formazan的量）與細(xì)胞數(shù)量呈線性關(guān)系。實(shí)驗材料及試劑：細(xì)胞96孔細(xì)胞培養(yǎng)板CO2培養(yǎng)箱酒精燈微量移液器酶標(biāo)儀CCK-8試劑盒等實(shí)驗步驟：1、取生長狀態(tài)良好的細(xì)胞，制備成一定濃度的細(xì)胞懸液。每孔加入100μl至96孔細(xì)胞培養(yǎng)板中。通常，細(xì)胞增…