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胞株移植瘤模型(cell derived xenograft, CDX),即將體外傳代培養(yǎng)的腫瘤細胞接種至免疫缺陷小鼠，也就是我們平時所說的裸鼠成瘤。裸鼠成瘤實驗，即在裸鼠皮下注入腫瘤細胞，觀察腫瘤的形成、發(fā)展及抗腫瘤藥物的效果。

1.動物選擇

一般選擇4-6周齡Nude裸鼠，需要提前到SPF環(huán)境中適應(yīng)1周。

2.接種部位與接種細胞量

接種部位常為皮下，靜脈或原位；細胞量一般是5*106個/200ul，但是不同的細胞系的接種量略有差別。

3.成瘤時間

皮下接種的細胞一般會在1-2周成瘤，一般不會超過1個月；尾靜脈和腹腔接種的細胞一般也是1周左右，需要密切觀察動物的體重與狀態(tài)進行判斷。

• 為什么腫瘤不長？

如果細胞接種后超過預(yù)期的觀察時間仍未成瘤，需要從以下方面進行排查原因：

一是細胞活力，細胞活力是影響腫瘤形成的重要原因，活力不夠不能成瘤，因此細胞消化下來PBS清洗后要盡快接種；

二是動物選擇，選擇的裸鼠周齡不宜過大，否則也會增大成瘤難度(如果還未成瘤建議更換缺陷程度更高的Nod-scid小鼠、NOG小鼠);

三是飼養(yǎng)環(huán)境，環(huán)境影響動物狀態(tài)，狀態(tài)差的鼠容易發(fā)生死亡，不易成瘤。

• 為什么瘤子長起來又消失？

很可能開始我們觀察到的腫瘤是炎癥反應(yīng)，到后來腫瘤細胞被小鼠自身吸收，需要繼續(xù)觀察腫瘤細胞吸收之后是否還能長出來，長不出來建議分析上述原因重新實驗。

• 需要觀察什么？

在腫瘤長出后，需要密切觀察動物的狀態(tài)、體重和瘤體積。瘤體積的測量一般采用公式V=ab2/2進行計算。動物體重的增加或者減少量，直接反應(yīng)著動物的整體狀態(tài)，評估腫瘤是否出現(xiàn)轉(zhuǎn)移等。

裸鼠成瘤狀態(tài)和瘤體積

瘤體積測量

瘤體積觀察

• 如何判斷腫瘤是否出現(xiàn)了轉(zhuǎn)移？

第一：病理剖檢。如果腫瘤出現(xiàn)了轉(zhuǎn)移，在肝臟或者腎臟等組織上肉眼可見明顯轉(zhuǎn)移灶。

病理剖檢

第二：小動物活體成像。如果接種的腫瘤細胞帶有熒光標簽或者熒光素酶，可以借助小動物活體成像儀進行觀察瘤細胞的大小和轉(zhuǎn)移情況。

活體成像

第三：小動物核磁。小動物核磁技術(shù)可以更明細那地觀察到腫瘤細胞在肝臟，肺臟或者其他器官的轉(zhuǎn)移情況

核磁檢測

• 哪些細胞能夠成瘤？

目前驗證過的細胞有HCT116、HePG2、A549、MKN45、AGS、 CT26 、NCI-H460、HT-29、SK-OV-3、MCF-7、B16、SGC7901、BEL-7402、BGC-823、PC-12等(待更新)。