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高效科研第一步:LB 培養(yǎng)基配制全攻略與避雷指南

瀏覽:303 發(fā)表時間:2025-07-22

LB培養(yǎng)基(Luria-Bertani培養(yǎng)基,也稱為Lysogeny Broth)是一種廣泛應(yīng)用于微生物學和分子生物學實驗室的液體或固體培養(yǎng)基,主要用于培養(yǎng)大腸桿菌(*Escherichia coli*)等細菌。它的配方簡單、營養(yǎng)豐富,能夠支持多種細菌的快速生長。


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No.1主要成分


LB培養(yǎng)基的經(jīng)典配方包含以下三種核心成分:

1. 胰蛋白胨(Tryptone):10 g/L  提供氮源、氨基酸和小肽,是細菌生長的主要營養(yǎng)來源。

2. 酵母提取物(Yeast Extract):5 g/L  提供維生素、核苷酸和其他生長因子。

3. 氯化鈉(NaCl):10 g/L  維持滲透壓平衡,促進細菌細胞膜的穩(wěn)定性。




No.2其他可能的調(diào)整


●配制固體培養(yǎng)基時,需添加**瓊脂(Agar)(通常15-20 g/L)。

●某些配方會調(diào)整NaCl濃度(如LB-Miller培養(yǎng)基含10 g/L,而LB-Lennox含5 g/L),以適應(yīng)不同實驗需求。



No.3配制方法


1. 將上述成分溶解于去離子水中。

2. 調(diào)節(jié)pH至中性(約7.0-7.4)。

3. 高溫高壓滅菌(121°C,15-20分鐘)。

4. 冷卻后根據(jù)需要倒入培養(yǎng)皿(固體培養(yǎng)基)或分裝至試管(液體培養(yǎng)基)。




No.4主要用途


1. 細菌擴增:用于大腸桿菌的常規(guī)培養(yǎng)、質(zhì)粒提取或蛋白表達。

2. 克隆實驗:在分子克隆中篩選轉(zhuǎn)化后的細菌。

3. 抗生素篩選:通過添加抗生素(如氨芐青霉素、卡那霉素)篩選攜帶抗性基因的菌株。

4. 基礎(chǔ)研究:適用于基因編輯、代謝分析等基礎(chǔ)實驗。




No.5優(yōu)缺點


優(yōu)點:成本低、配制簡單、適用性廣,適合快速培養(yǎng)非營養(yǎng)缺陷型細菌。

缺點:營養(yǎng)過于豐富,可能導致部分細菌代謝過快(如產(chǎn)生過量乙酸),影響長時間培養(yǎng)或高密度發(fā)酵。




No.6注意事項


1. 滅菌后若發(fā)現(xiàn)渾濁或沉淀,可能被污染,需重新配制。

2. 固體培養(yǎng)基需趁熱倒板,避免瓊脂凝固。

3. 若用于篩選抗生素抗性菌株,需在培養(yǎng)基冷卻至約50°C時加入抗生素,避免高溫破壞藥物活性。




No.7名稱來源


“LB”源于發(fā)明者薩爾瓦多·盧里亞(Salvador Luria)和朱塞佩·貝爾塔尼(Giuseppe Bertani),最初用于研究λ噬菌體的溶原性(lysogeny),因此也被稱為“Lysogeny Broth”。


主營項目


1. 動物實驗

動物飼養(yǎng)、疾病造模、行為學檢測、心功能、無創(chuàng)血壓、血常規(guī)、全自動生化檢測等


2. 細胞實驗

CCK8/MTT、原代細胞分離、流式細胞實驗、細胞劃痕、侵襲、遷移、EDU染色、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定株


3. 分子生物學

PCR檢測、熒光定量PCR、絕對定量PCR、端粒酶長度、pull down、雙熒光素酶、SSR、SNP檢測等


4. 蛋白實驗

WB、Co-IP、酵母雙雜


5. 病理實驗

HE染色、免疫組學、電鏡


6. 生理生化實驗

肝腎功能、抗氧化、免疫反應(yīng)等生理免疫指標;動植物營養(yǎng)指標、微量元素、重金屬、酶活等。


7. 多組學實驗

基因組、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、蛋白組、代謝組、微生物多樣性、宏基因組、生信分析


8. 整體課題實驗

方案設(shè)計、整體實驗交付、標書寫作、論文潤色、協(xié)助投稿


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