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研究小鼠焦慮行為的方法有很多，其中行為學實驗之高架十字迷宮任務是一種評估嚙齒動物類焦慮行為比較經(jīng)典的一種方法。

該測試是在具有兩個張開和兩個閉合臂的加號形裝置上進行的，正式實驗開始時，允許動物自由探索迷宮5分鐘，同時記錄進入張開和閉合臂的持續(xù)時間和頻率。

該任務基于一種接近—回避沖突，這意味著該動物面臨著探索新環(huán)境的傾向與對高處和開放空間的無條件恐懼之間的斗爭。因此，與對照動物相比，類似焦慮狀態(tài)的特征是張開臂回避增加。

設施準備

1.高架十字迷宮

2.工業(yè)相機（放置在迷宮正上方）

3.間接白光

4.數(shù)字照度計

5.動物行為學分析軟件

實驗方法

1. 迷宮所處位置應遠離噪音、氣味等外來干擾。您可以選擇在行為實驗室內(nèi)放置一個低強度白噪聲源，來緩解小鼠的焦慮。引導線索，例如房間周圍墻壁上的圖畫，可能會使動物的活動偏向迷宮的某個區(qū)域。因此，必須移除任何可能用作提示的繪畫或人工制品。實驗者在整個實驗過程中不要發(fā)出任何過度的噪音或移動，也不要產(chǎn)生刺激性氣味，因為它可能對小鼠產(chǎn)生焦慮刺激。

2. 房間內(nèi)的照明必須保持恒定并根據(jù)要執(zhí)行的分析進行控制。鑒于低強度光度會減少張開臂的回避，而抗焦慮效果應該在更高強度的照明下進行，所以要根據(jù)不同的分析目的選擇對應的強度照明。

3. 將這些實驗條件調(diào)整至標準后，動物將被帶入實驗室，在籠中放置45至60分鐘，讓其從移動的應激中恢復。

4 在開始測試之前，用70%乙醇清潔迷宮，以清除設備上積聚的任何污垢或氣味。

5. 打開攝像機，將第一只小鼠放在迷宮的中心正方形中，面對一個張開的臂，最好是與實驗者相對的那個。

6. 實驗者將站在離迷宮盡可能遠的地方，并在實驗動物看不見的地方， 如有必要，站在房間外面。

7. 自由探索5分鐘后，老鼠會被移出迷宮并回到它的籠子里。

8. 清除所有尿液和糞便，并用70%乙醇徹底清潔迷宮，以去除第一只小鼠的任何殘留氣味。之后，可以將下一只小鼠提交給測試。

9. 重復步驟 5-8，直到所有動物都經(jīng)過測試。

10. 錄制的視頻可以通過自動計算機軟件進行分析。

分析參數(shù)

1.進入閉合臂中的條目和閉合臂中花費的時間：整個實驗過程中迷宮上總運動的測量。

2.進入張開雙臂的條目和張開雙臂花費的時間：可用作焦慮的逆向測量，也就是說，減少張開雙臂回避反映了較低水平的焦慮。

3.風險評估行為：低頭的頻率、持續(xù)時間（進入張開雙臂時頭部向地板向下移動）和伸展姿勢（頭部伸展姿勢，兩只或三只爪子放在張開的臂上， 退回到以前的位置）可以直接衡量焦慮，即風險評估行為的增加表明焦慮水平較高。

4.如果小鼠在測試過程中從張開的臂上掉下來，實驗者必須立即將其撿起并放回張開的臂上。在進行實驗分析時應注意并考慮這一點，這種動物可以從最終分析中排除。

5.只有當動物將四只爪子都放在中心方塊外并放在其中一個臂上時，才會考慮進入張開或閉合的臂。然而，從給定的臂伸出兩只爪子，已經(jīng)足以停止計算在臂上花費的時間。如果動物用這兩只爪子返回臂，則應繼續(xù)計時，但不會記錄任何條目。

結果與討論

1.小鼠焦慮行為分析

小鼠在高架十字迷宮實驗中的表現(xiàn)可以反映其對不同環(huán)境的適應能力。一般情況下，小鼠會傾向于在封閉臂中逗留，因為這里提供了視覺遮蔽，使其感到安全。相反地，開放臂暴露在外，容易導致小鼠產(chǎn)生焦慮。因此，通過觀察小鼠在開放臂和封閉臂中的行為表現(xiàn)，可以初步評估它們的焦慮水平。

2.小鼠抑郁行為分析

除了焦慮行為外，高架十字迷宮實驗還可用于評估小鼠的抑郁行為。抑郁行為常表現(xiàn)為對原本富有探索性的環(huán)境失去興趣。在實驗中，通過觀察小鼠在高架十字迷宮中的活動頻率、行動速度和總距離等指標，可以反映出其抑郁程度。例如，若小鼠在迷宮中表現(xiàn)出較低的活動水平，可能表明其存在抑郁傾向。

3.藥物或遺傳干預的作用

在神經(jīng)生物學領域，高架十字迷宮實驗常被用于評估藥物或遺傳干預對小鼠焦慮和抑郁行為的影響。通過比較實驗組與對照組之間的行為差異，可以揭示藥物或基因操作在緩解焦慮或抑郁癥狀方面的潛在效果。這對藥物篩選和遺傳研究具有重要意義。

4.實驗條件對結果的影響

需要注意的是，實驗條件對高架十字迷宮實驗的結果有很大影響。例如，環(huán)境光照、噪聲、氣味等都可能影響到小鼠的行為表現(xiàn)。因此，在設計和進行實驗時，必須嚴格控制這些變量，確保實驗結果的準確性。

結論

高架十字迷宮實驗是一種有效的評估小鼠焦慮和抑郁行為的動物行為學方法。通過對藥物或遺傳干預前后小鼠行為的評估，高架十字迷宮實驗已廣泛應用于神經(jīng)生物學領域。然而，仍需注意實驗條件對結果的影響，以確保研究的可靠性。

主營項目

1. 動物實驗

動物飼養(yǎng)、疾病造模、行為學檢測、心功能、無創(chuàng)血壓、血常規(guī)、全自動生化檢測等

2. 細胞實驗

CCK8/MTT、原代細胞分離、流式細胞實驗、細胞劃痕、侵襲、遷移、EDU染色、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定株

3. 分子生物學

PCR檢測、熒光定量PCR、絕對定量PCR、端粒酶長度、pull down、雙熒光素酶、SSR、SNP檢測等

4. 蛋白實驗

WB、Co-IP、酵母雙雜

5. 病理實驗

HE染色、免疫組學、電鏡

6. 生理生化實驗

肝腎功能、抗氧化、免疫反應等生理免疫指標;動植物營養(yǎng)指標、微量元素、重金屬、酶活等。

7. 多組學實驗

基因組、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、蛋白組、代謝組、微生物多樣性、宏基因組、生信分析

8. 整體課題實驗

方案設計、整體實驗交付、標書寫作、論文潤色、協(xié)助投稿

康旭禾生物提供包括動物實驗、細胞實驗、分子實驗、病理實驗、流式檢測實驗及論文翻譯、潤色、投稿輔助等相關的各項服務。

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