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眾所周知，無論是在科研課題設(shè)計(jì)，還是在藥物臨床前實(shí)驗(yàn)階段，動物實(shí)驗(yàn)都扮演者重要的角色，通過動物實(shí)驗(yàn)我們能夠：

1. 確定潛在的作用靶器官和治療作用出現(xiàn)的時(shí)間、性質(zhì)、程度及其可逆性；

2. 確定臨床監(jiān)測的指標(biāo)和安全性參數(shù)；

3. 便于探究疾病潛在作用機(jī)制和相關(guān)信號通路。

它的完整性、合理性、論證性直接決定著這個(gè)課題或者這個(gè)項(xiàng)目的水平。也就是說，在實(shí)驗(yàn)開始之前，必須把所有細(xì)枝末節(jié)給想清楚（萬一沒整明白，雜志編輯又要你補(bǔ)，就該傻眼了），這里可以讓動物實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)豐富的師兄師姐或者負(fù)責(zé)動物實(shí)驗(yàn)這塊兒的老師聽聽你的方案，或許有時(shí)候他們一句話就能點(diǎn)醒一個(gè)“蒙鼓人”。

往往一個(gè)完整的動物方案，它還會把后續(xù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)給考慮進(jìn)去，比如說這個(gè)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)，雜志要求n等于幾，中途鼠如果掛了，會不會影響我們最后的統(tǒng)計(jì)結(jié)果。如果沒設(shè)計(jì)好，我們不僅得不到有用的數(shù)據(jù)，而且你想看出什么趨勢來，也很難。況且，后續(xù)如果要補(bǔ)做的話，費(fèi)時(shí)又費(fèi)錢，你導(dǎo)多多少少也會有點(diǎn)生氣吧，所以咱們前期要優(yōu)化實(shí)驗(yàn)方案、優(yōu)化統(tǒng)計(jì)學(xué)方法、優(yōu)化實(shí)驗(yàn)動物只數(shù)，爭取一批實(shí)驗(yàn)就把所需要的數(shù)據(jù)都拿到。

具體來講動物實(shí)驗(yàn)要注意哪些內(nèi)容呢，有哪些原則要遵循，我們一塊兒看一下。

No.1

動物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的原則

動物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)需要遵循一系列科學(xué)、倫理和操作原則，以確保實(shí)驗(yàn)的可靠性、可重復(fù)性以及對動物福利的尊重。以下是動物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的主要原則：

1.科學(xué)性原則

●明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康模簩?shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)圍繞明確的科學(xué)問題或假設(shè)展開，避免盲目實(shí)驗(yàn)。

●合理假設(shè)：基于現(xiàn)有文獻(xiàn)和前期研究，提出可驗(yàn)證的科學(xué)假設(shè)。

●可重復(fù)性：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)應(yīng)詳細(xì)、規(guī)范，確保其他研究者能夠重復(fù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

2.倫理原則

●3R原則：

?替代（Replacement）：盡可能使用非動物實(shí)驗(yàn)方法（如細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、計(jì)算機(jī)模型）。

?減少（Reduction）：使用最少數(shù)量的動物達(dá)到統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

?優(yōu)化（Refinement）：改進(jìn)實(shí)驗(yàn)方法，減少動物痛苦和不適。

●動物福利：確保實(shí)驗(yàn)過程中動物的生理和心理健康，避免不必要的痛苦。

●倫理審批：實(shí)驗(yàn)前必須獲得動物實(shí)驗(yàn)倫理委員會的批準(zhǔn)。

3.統(tǒng)計(jì)學(xué)原則

●樣本量計(jì)算：根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和預(yù)期效應(yīng)大小，計(jì)算所需的動物數(shù)量，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

●隨機(jī)分組：實(shí)驗(yàn)動物應(yīng)隨機(jī)分配到實(shí)驗(yàn)組和對照組，避免偏差。

●對照設(shè)置：設(shè)立適當(dāng)?shù)膶φ战M（如空白對照、陰性對照、陽性對照），確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。

●重復(fù)實(shí)驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)應(yīng)重復(fù)多次，以驗(yàn)證結(jié)果的穩(wěn)定性和可重復(fù)性。

4.操作規(guī)范原則

●標(biāo)準(zhǔn)化操作：實(shí)驗(yàn)操作（如給藥、采樣、手術(shù)等）應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)化，減少人為誤差。

●麻醉與鎮(zhèn)痛：在可能引起疼痛的操作中，使用適當(dāng)?shù)穆樽砗玩?zhèn)痛劑。

●數(shù)據(jù)記錄：詳細(xì)記錄實(shí)驗(yàn)過程中的所有數(shù)據(jù)，包括動物狀態(tài)、操作時(shí)間、劑量等。

5. 動物模型選擇原則

●物種選擇：根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇適合的動物物種（如小鼠、大鼠、兔子等）。

●品系選擇：根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇近交系、突變系或轉(zhuǎn)基因動物。

●年齡和性別：明確實(shí)驗(yàn)動物的年齡和性別，避免因這些因素影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

6. 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后的處理原則

●人道終點(diǎn)：在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)，采用人道方式處死動物，避免不必要的痛苦。

●樣本處理：妥善處理動物尸體和實(shí)驗(yàn)廢棄物，遵守實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范。

7. 透明報(bào)告原則

●詳細(xì)記錄：實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)、操作步驟、數(shù)據(jù)分析和結(jié)果應(yīng)詳細(xì)記錄，確保實(shí)驗(yàn)透明。

●倫理聲明：在發(fā)表論文時(shí)，注明實(shí)驗(yàn)已通過倫理審查并遵守3R原則。

注意事項(xiàng)

●動物福利優(yōu)先：始終將動物福利放在首位，避免不必要的痛苦和傷害。

●實(shí)驗(yàn)人員培訓(xùn)：實(shí)驗(yàn)人員需接受動物實(shí)驗(yàn)操作和倫理培訓(xùn)。

●實(shí)驗(yàn)記錄保存：詳細(xì)記錄實(shí)驗(yàn)過程和數(shù)據(jù)，確保實(shí)驗(yàn)透明和可重復(fù)。

No.2

動物實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)考慮如下幾個(gè)方面

設(shè)計(jì)動物實(shí)驗(yàn)需要系統(tǒng)化、科學(xué)化的步驟，以確保實(shí)驗(yàn)的可靠性、可重復(fù)性以及對動物福利的尊重。以下是動物實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的主要步驟：

1.明確實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

●提出科學(xué)問題：明確實(shí)驗(yàn)要解決的科學(xué)問題或驗(yàn)證的假設(shè)。

●設(shè)定實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)：確定實(shí)驗(yàn)的具體目標(biāo)，例如研究基因功能、藥物效果或疾病機(jī)制。

2.文獻(xiàn)調(diào)研與可行性分析

●查閱文獻(xiàn)：了解相關(guān)領(lǐng)域的研究現(xiàn)狀，避免重復(fù)研究。

●可行性分析：評估實(shí)驗(yàn)?zāi)繕?biāo)是否可以通過動物實(shí)驗(yàn)實(shí)現(xiàn)，并確定所需資源（如時(shí)間、經(jīng)費(fèi)、設(shè)備等）。

3.選擇動物模型

●物種選擇：根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪x擇適合的動物（如小鼠、大鼠、兔子等）。

●品系選擇：根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求選擇近交系、突變系或轉(zhuǎn)基因動物。

●年齡和性別：明確實(shí)驗(yàn)動物的年齡和性別，避免因這些因素影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

4.實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)

●對照組設(shè)置：

?空白對照：未接受任何處理的動物。

?陰性對照：接受安慰劑或模擬處理的動物。

?陽性對照：接受已知有效處理的動物。

●樣本量計(jì)算：根據(jù)統(tǒng)計(jì)學(xué)方法確定所需動物數(shù)量，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

●隨機(jī)分組：避免偏差，確保實(shí)驗(yàn)組和對照組的動物隨機(jī)分配。

●重復(fù)實(shí)驗(yàn)：確保實(shí)驗(yàn)的可重復(fù)性，通常需要至少3次獨(dú)立實(shí)驗(yàn)。

5. 動物模型選擇原則

●根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康暮鸵髞磉x擇，實(shí)驗(yàn)動物選擇一般需要滿足以下原則：

1.相似性原則：研究對象各方面（功能、代謝、結(jié)構(gòu)等）與人類相似的動物。（使用系統(tǒng)發(fā)育水平最低的動物，符合3R原則中的替代原則）

2.特異性原則：解剖、生理特點(diǎn)符合實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊蟮膶?shí)驗(yàn)動物。

3.標(biāo)準(zhǔn)化原則：遺傳背景清楚，模型性狀顯著且穩(wěn)定。

4.經(jīng)濟(jì)易獲性原則：易獲得、價(jià)格便宜、易飼養(yǎng)。

5.適宜規(guī)格原則：選用與實(shí)驗(yàn)要求相適應(yīng)的實(shí)驗(yàn)動物規(guī)格。

（1）年齡：一般選擇成熟后青壯年動物。

（2）體重：在正常營養(yǎng)狀態(tài)和飼養(yǎng)條件下，體重與年齡有一定相關(guān)性。

（3）性別：同品種不同性別動物對外界刺激反應(yīng)一般不一致。

注：實(shí)驗(yàn)動物應(yīng)由取得實(shí)驗(yàn)動物許可證的單位提供，并提供動物的種屬、品系、來源、年齡、性別、體重、飼養(yǎng)環(huán)境和條件、動物飲食、動物健康狀況（包括意外死亡）等信息。

6. 動物數(shù)量的確定

樣本含量是指動物實(shí)驗(yàn)所需要的動物數(shù)量。樣本含量過小，抽樣誤差大，推論總體的精密度和準(zhǔn)確度都比較差，不能發(fā)現(xiàn)實(shí)際存在的差別；樣本含量過大，首先不符合動物福利，同時(shí)也浪費(fèi)人力、物力、財(cái)力和時(shí)間。

針對不同的研究目的，樣本含量有不同的確定方式，有的實(shí)驗(yàn)是得到足夠的組織標(biāo)本進(jìn)行分析、有的實(shí)驗(yàn)是利用少量動物進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)或初步探索性實(shí)驗(yàn)、有的是進(jìn)行一個(gè)假設(shè)的驗(yàn)證的正規(guī)實(shí)驗(yàn)。

需注意以下兩點(diǎn)：

（1）由于考慮實(shí)驗(yàn)中動物死亡、剔除等因素，實(shí)驗(yàn)中各組實(shí)際使用的動物數(shù)量應(yīng)比理論上計(jì)算的樣本量適當(dāng)增加。

（2）不均衡設(shè)計(jì)的應(yīng)用。在一個(gè)研究中，并不要求各組都有相同數(shù)量的實(shí)驗(yàn)單位。實(shí)際上，我們通?？梢栽O(shè)計(jì)一組的實(shí)驗(yàn)單位多于其他組。最常見的不均衡設(shè)計(jì)是高劑量組動物較多，以彌補(bǔ)研究中動物死亡造成的數(shù)據(jù)丟失，或低劑量組動物數(shù)較多，以提高閾值水平效應(yīng)檢測的靈敏性或確定無效應(yīng)的可信性。

7. 實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的獲取

除了一些傳統(tǒng)常規(guī)的取材后檢測（組織學(xué)、組織形態(tài)學(xué)指標(biāo)、病理生理生化指標(biāo)等），隨著小動物成像技術(shù)的發(fā)展，活體成像這種非侵襲性成像在研究中發(fā)揮著越來越重要的作用。

8. 數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)和分析

幾乎所有的實(shí)驗(yàn)的結(jié)果，包括有非常明顯的實(shí)驗(yàn)效果的實(shí)驗(yàn)結(jié)果，都需要用適當(dāng)?shù)慕y(tǒng)計(jì)分析方法進(jìn)行評價(jià)。

數(shù)據(jù)的分析應(yīng)主要圍繞研究的目的進(jìn)行，對實(shí)驗(yàn)的假設(shè)進(jìn)行驗(yàn)證。同時(shí)，數(shù)據(jù)分析的主要目標(biāo)是提取數(shù)據(jù)中所有能被解釋的有用信息，考慮生物的變異和實(shí)驗(yàn)所產(chǎn)生的誤差對研究結(jié)果的影響，尤其是防止抽樣誤差對于實(shí)驗(yàn)（治療）效果的錯誤判斷的重要工具。

生物統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)的方法很多，最常用的統(tǒng)計(jì)學(xué)方法有：各組間計(jì)量資料的比較用方差分析法（F檢驗(yàn)，one-way anova單因素方差分析），各組間計(jì)數(shù)資料的比較用卡方檢驗(yàn)，通過概率計(jì)算得出各組間差異是否具有顯著性意義。

一般認(rèn)為兩組數(shù)據(jù)之間差異概率P≤0.05具有顯著性意義，P≤0.01具有極顯著性意義，表明兩組數(shù)據(jù)之間的差異不是抽樣誤差，而是處理因素作用所致。

現(xiàn)在一般實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)學(xué)處理有專用軟件，如SPSS、SAS、SYSTAT、GraphPad Prism、R語言等。

主營項(xiàng)目

1. 動物實(shí)驗(yàn)

動物飼養(yǎng)、疾病造模、行為學(xué)檢測、心功能、無創(chuàng)血壓、血常規(guī)、全自動生化檢測等

2. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

CCK8/MTT、原代細(xì)胞分離、流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕、侵襲、遷移、EDU染色、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定株

3. 分子生物學(xué)

PCR檢測、熒光定量PCR、絕對定量PCR、端粒酶長度、pull down、雙熒光素酶、SSR、SNP檢測等

4. 蛋白實(shí)驗(yàn)

WB、Co-IP、酵母雙雜

5. 病理實(shí)驗(yàn)

HE染色、免疫組學(xué)、電鏡

6. 生理生化實(shí)驗(yàn)

肝腎功能、抗氧化、免疫反應(yīng)等生理免疫指標(biāo);動植物營養(yǎng)指標(biāo)、微量元素、重金屬、酶活等。

7. 多組學(xué)實(shí)驗(yàn)

基因組、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、蛋白組、代謝組、微生物多樣性、宏基因組、生信分析

8. 整體課題實(shí)驗(yàn)

方案設(shè)計(jì)、整體實(shí)驗(yàn)交付、標(biāo)書寫作、論文潤色、協(xié)助投稿

康旭禾生物提供包括動物實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、分子實(shí)驗(yàn)、病理實(shí)驗(yàn)、流式檢測實(shí)驗(yàn)及論文翻譯、潤色、投稿輔助等相關(guān)的各項(xiàng)服務(wù)。

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