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HE染色過(guò)程中常見(jiàn)問(wèn)題分析及解決對(duì)策

蘇木精-伊紅染色法（HE染色法），作為石蠟切片技術(shù)中的經(jīng)典染色方法，廣泛應(yīng)用于組織學(xué)、胚胎學(xué)及病理學(xué)的教學(xué)與科研中。該方法利用堿性的蘇木精使細(xì)胞核及胞質(zhì)核酸呈現(xiàn)紫藍(lán)色，而酸性的伊紅則讓細(xì)胞質(zhì)與細(xì)胞外基質(zhì)染上紅色。常見(jiàn)問(wèn)題及解決方案一、著色異常（過(guò)深或過(guò)淺）著色不當(dāng)常因染色時(shí)間控制不當(dāng)所致。HE染色需借助鏡檢來(lái)精確控制時(shí)間，預(yù)實(shí)驗(yàn)可幫助確定最佳染色時(shí)長(zhǎng)。通常，新鮮蘇木素的染色時(shí)間約為1-3分鐘，分化時(shí)間亦需適中，過(guò)度分化后可通過(guò)水洗并復(fù)染蘇木素來(lái)調(diào)整。二、…

做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)，我們要分幾組？每組要幾只動(dòng)物？怎么分配動(dòng)物？一文全解答！

許多剛開(kāi)始接觸動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的小伙伴可能都會(huì)有點(diǎn)迷茫，不知道怎么給實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組，要分幾組、每組要幾只動(dòng)物，怎么分配。別擔(dān)心，今天的文章就來(lái)給你一一解答。我們要分幾組？做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)時(shí)，我們會(huì)設(shè)置不同的實(shí)驗(yàn)小組。怎么分組、每組多少動(dòng)物，這些都直接影響到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信度和統(tǒng)計(jì)分析。所以，設(shè)置實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組是非常重要的一步。一般來(lái)說(shuō)，我們可以分為自身對(duì)照組、平行對(duì)照組。平行對(duì)照組又可以細(xì)分為正對(duì)照組和負(fù)對(duì)照組（也就是空白對(duì)照組）。自身對(duì)照組：就是比較動(dòng)物實(shí)驗(yàn)前后的…

2025 國(guó)自然：最具潛力科研熱點(diǎn)評(píng)選——獨(dú)木橋太難擠，另辟蹊徑也不錯(cuò)

眾所周知，國(guó)自然看重創(chuàng)新，因此那些引領(lǐng)潮流、極具創(chuàng)新性的前沿項(xiàng)目更能吸引研究者的目光。然而有一些研究方向雖然不是最炙手可熱的焦點(diǎn)，卻蘊(yùn)含著巨大潛力，默默貢獻(xiàn)著重要價(jià)值，有著深厚的科學(xué)基礎(chǔ)和廣闊的應(yīng)用前景。這些熱點(diǎn)可能涉及細(xì)胞層面的精細(xì)分析、疾病發(fā)生機(jī)制的深入研究、新技術(shù)在醫(yī)學(xué)中的應(yīng)用等多個(gè)方面。它們有望為解決當(dāng)前醫(yī)學(xué)難題提供新的思路和方法，推動(dòng)醫(yī)學(xué)科研不斷向前發(fā)展。通過(guò)對(duì)這些潛力熱點(diǎn)的評(píng)選和分析，我們可以更好地把握醫(yī)學(xué)科研的未來(lái)趨勢(shì)，為科研工作者…

流式分析、分選必備 | 常見(jiàn)樣本內(nèi)各免疫細(xì)胞亞群的比例

對(duì)于低含量的目的細(xì)胞，知道其大致比例，有助于確定流式分析、分選實(shí)驗(yàn)流程中的許多關(guān)鍵要素，如：①需要染色的樣本總量②上流式時(shí)需要采集的細(xì)胞總數(shù)③配色時(shí)染料的選擇④分選時(shí)純度、得率、活性和時(shí)長(zhǎng)的權(quán)衡以下整理了人外周血、小鼠、大鼠各細(xì)胞亞群比例。這些數(shù)值僅供參考（所有顯示的百分比是每個(gè)樣本中各細(xì)胞亞群占白細(xì)胞總數(shù)的百分比）?？赡軙?huì)因樣品制備、個(gè)體差異和所用動(dòng)物的品系而異。表1-人外周血各細(xì)胞群比例表2-小鼠各細(xì)胞群比例表3-大鼠各細(xì)胞群比例補(bǔ)充內(nèi)容關(guān)于需要獲…

實(shí)驗(yàn)難題 | 中藥含藥血清如何制備？以及在動(dòng)物選擇、給藥方式和采血時(shí)間上怎么確定？

1. 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇原則在選擇用于血清藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)的動(dòng)物時(shí)，需確保體外培養(yǎng)細(xì)胞能在該動(dòng)物血清中良好生長(zhǎng)且形態(tài)正常，對(duì)照組血清質(zhì)量需保持穩(wěn)定，且血清添加量高。為減小或避免動(dòng)物血清與人血清在理化及生物特性上的差異，應(yīng)優(yōu)先選擇與人類(lèi)生物特性相近的動(dòng)物。離體器官、組織、細(xì)胞的供體動(dòng)物與含藥血清的供體動(dòng)物應(yīng)盡量保持一致來(lái)源，故大鼠與小鼠常被選用。此外，有學(xué)者指出，臨床患者多處于某種病理狀態(tài)，而中藥在病理狀態(tài)動(dòng)物體內(nèi)的作用部位有效成分血藥濃度與正常狀態(tài)有所差異。通過(guò)…

發(fā)1篇基礎(chǔ)SCI，最少要做多少個(gè)實(shí)驗(yàn)

普通醫(yī)生短短1年內(nèi)，哪能搞的定實(shí)驗(yàn)?zāi)?？不信？帶你一起算算?shí)驗(yàn)量：發(fā)表一篇基礎(chǔ)科學(xué)(SCI)論文所需的實(shí)驗(yàn)數(shù)量會(huì)根據(jù)論文的質(zhì)量和影響力有所不同。以下是根據(jù)不同檔次的SCI論文分類(lèi)的平均實(shí)驗(yàn)需求：01頂級(jí)論文 影響因子20分左右及以上 ●正文通常包含6-7個(gè)圖表，每個(gè)圖表平均涉及6-7個(gè)實(shí)驗(yàn)?！裱a(bǔ)充材料可能再增加6個(gè)圖表，每個(gè)圖表平均4個(gè)實(shí)驗(yàn)?！窨傆?jì)至少需要60個(gè)實(shí)驗(yàn)，需獨(dú)立重復(fù)3次以上，成功率約為1/3，總共需做約540個(gè)實(shí)驗(yàn)。02重量級(jí)論文 影響因子9-15分 ●正文包含6-7個(gè)圖表，每…

國(guó)自然熱點(diǎn)追蹤——線(xiàn)粒體代謝、線(xiàn)粒體功能障礙與胃腸道疾病的調(diào)控

目前已有大量研究指出線(xiàn)粒體在炎癥性腸病（IBD）和結(jié)直腸癌（CRC）中發(fā)揮關(guān)鍵作用，但線(xiàn)粒體功能障礙與這兩種疾病之間的因果關(guān)系尚不清楚。一些研究表明，炎癥反應(yīng)和腸道微生物群可直接影響線(xiàn)粒體，導(dǎo)致其功能異常；然而，其他研究則顯示，即時(shí)在沒(méi)有發(fā)生炎癥的情況下，線(xiàn)粒體功能也可能受到影響。其次，IBD或CRC治療的挑戰(zhàn)之一是不同患者之間的異質(zhì)性，隨著組學(xué)的發(fā)展，提供了探索IBD和線(xiàn)粒體功能紊亂之間關(guān)系的工具，研究發(fā)現(xiàn)脂肪酸β-氧化（FAO）和丙酮酸代謝、氨基酸代謝和三羧酸循…

絕了！細(xì)胞實(shí)驗(yàn)里這個(gè)超高頻實(shí)驗(yàn)怎么計(jì)算？分分鐘學(xué)會(huì)

在細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的廣袤領(lǐng)域中，為了深入探究藥物劑量與某種生物效應(yīng)之間的微妙量效關(guān)系，我們會(huì)對(duì)細(xì)胞等進(jìn)行一系列具有層次變化的濃度處理。接著，我們將測(cè)定特定的生物指標(biāo)，并繪制出量-效關(guān)系曲線(xiàn)。而后續(xù)的重要環(huán)節(jié)，便是依托這神奇的曲線(xiàn)，計(jì)算出半數(shù)抑制濃度 IC50 或是半數(shù)效應(yīng)濃度 EC50，從而精準(zhǔn)地揭示藥物對(duì)該指標(biāo)變化的影響能力。接下來(lái)，以考察化療藥物對(duì)細(xì)胞的殺傷作用為典型示例，向細(xì)胞給予一系列不同濃度的藥物處置，進(jìn)而測(cè)定細(xì)胞的存活率（Cell viability），為大家詳細(xì)演示…

做實(shí)驗(yàn)應(yīng)該選擇哪種鼠？3分鐘幫你分清實(shí)驗(yàn)鼠品系及用途！

實(shí)驗(yàn)小鼠和大鼠具有遺傳背景清晰與來(lái)源明確等特征，在探索基因功能、疾病機(jī)理及藥物篩選等科研領(lǐng)域具有重要作用，是腫瘤學(xué)、生理學(xué)、免疫學(xué)、藥物研發(fā)及基因工程研究的寶貴資源。本文將介紹幾種主流的大小鼠品系及其應(yīng)用，不知道怎么選實(shí)驗(yàn)鼠的，記得收藏哦~近交系小鼠至少經(jīng)20代的同窩交配培育而成，同品系內(nèi)所有個(gè)體都可追溯到起源于第20代或以后代數(shù)的一對(duì)共同祖先。基因純合，同基因型，表型均一，遺傳穩(wěn)定，背景資料完整。常見(jiàn)品系有：BALB/C 小鼠：常用于單克隆抗體、腫瘤學(xué)、生…

為什么你的流式實(shí)驗(yàn)總做不好？盤(pán)點(diǎn)24個(gè)流式高頻問(wèn)題

這篇文章為大家總結(jié)了一系列流式實(shí)驗(yàn)常見(jiàn)問(wèn)題，看完絕對(duì)可以有效避坑（建議存入收藏夾備用）！1. 無(wú)信號(hào)/熒光強(qiáng)度弱 補(bǔ)償問(wèn)題多色流式配色很關(guān)鍵，低表達(dá)的抗原可以用相同熒光素的高表達(dá)抗原代替，或者使用補(bǔ)償微球。用于檢測(cè)的抗體不足一定要做抗體滴定，按照說(shuō)明書(shū)的要求加抗體。無(wú)法接近細(xì)胞內(nèi)靶標(biāo)確定好抗原的表達(dá)位置，選擇合適的染色方法和刺激方法。細(xì)胞內(nèi)染色 - 熒光染料結(jié)合分子太大細(xì)胞內(nèi)染色實(shí)驗(yàn)應(yīng)使用小分子量的熒光染料。激光器未對(duì)齊做實(shí)驗(yàn)前一定要確保儀器沒(méi)有問(wèn)題。流…

國(guó)自然“C位擔(dān)當(dāng)”：巨噬細(xì)胞的來(lái)源、分類(lèi)、研究方法、應(yīng)用&文獻(xiàn)解讀

以巨噬細(xì)胞為關(guān)鍵詞在PubMed搜索，2014至2024年的十年間發(fā)文合計(jì)156356篇，年均發(fā)文14214篇。其中2021年達(dá)到發(fā)文量頂峰21261篇，2020增長(zhǎng)率最快為16.07%?？梢?jiàn)大家對(duì)巨噬細(xì)胞的解析仍處于熱門(mén)階段。幾乎每一種人類(lèi)疾病都涉及到巨噬細(xì)胞，因此近年來(lái)也成為了生命科學(xué)和醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的研究熱點(diǎn)。巨噬細(xì)胞作為機(jī)體免疫系統(tǒng)中的重要組成部分，在免疫應(yīng)答、炎癥反應(yīng)、疾病治療等方面具有廣泛的應(yīng)用和研究前景。因此，巨噬細(xì)胞的性質(zhì)、功能、調(diào)控機(jī)制以及與其他細(xì)胞的相互作用等方面都成為研究的…

國(guó)自然申請(qǐng)|細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，怎么設(shè)計(jì)才算嚴(yán)謹(jǐn)？——如何選擇合適的細(xì)胞？

在國(guó)自然項(xiàng)目中，細(xì)胞實(shí)驗(yàn)一般都是必選項(xiàng)，在功能和機(jī)制實(shí)驗(yàn)中通常都要涉及。但越是“常規(guī)”實(shí)驗(yàn)，設(shè)計(jì)嚴(yán)謹(jǐn)就越難，下面就盡量詳細(xì)說(shuō)明要考慮的因素。要設(shè)計(jì)一個(gè)嚴(yán)謹(jǐn)且有效的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，可以遵循以下步驟PART 01確定實(shí)驗(yàn)?zāi)康氖紫龋鞔_您的實(shí)驗(yàn)?zāi)康?。不同的研究目?biāo)可能需要不同類(lèi)型的細(xì)胞。例如，如果研究乳腺癌，您可能需要特定的乳腺癌細(xì)胞系，如T47D用于管腔型乳腺癌，或MDA-MB-468用于三陰性乳腺癌。選擇適當(dāng)?shù)募?xì)胞系或原代細(xì)胞1. 細(xì)胞系這些是已建立的培養(yǎng)細(xì)胞系，如乳腺癌細(xì)胞系…

省自然真的比國(guó)自然難度小嗎？

省自然真的比國(guó)自然難度小嗎？8月國(guó)自然放榜后，真是幾家歡喜幾家愁呀；能中標(biāo)固然美事，但若遺憾落選，也無(wú)需絕望。卷不動(dòng)國(guó)自然，很多想要晉升的醫(yī)生不甘心，申請(qǐng)省自然可行嗎？省自然比國(guó)自然簡(jiǎn)單在哪里呢？01申請(qǐng)條件國(guó)自然：需具備基礎(chǔ)研究經(jīng)驗(yàn)，持有高級(jí)職務(wù)或博士學(xué)位（也可獲推）。針對(duì)國(guó)青/優(yōu)青等，對(duì)年齡等也有限制。省自然：對(duì)申請(qǐng)人基礎(chǔ)研究經(jīng)驗(yàn)關(guān)注度低，但需確保在資助期內(nèi)每年在該單位從事研究不少于6個(gè)月（各省份會(huì)有差異）。02創(chuàng)新性國(guó)自然：國(guó)自然傾向于支持前沿性、…

康旭禾動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

康旭禾動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)是科學(xué)研究中用以觀察和理解動(dòng)物行為的一種手段，常用于評(píng)估動(dòng)物的溝通、情緒表達(dá)、社交、學(xué)習(xí)和繁殖行為等。這些實(shí)驗(yàn)在神經(jīng)科學(xué)、心理學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用，特別是在研究人類(lèi)疾病的發(fā)病機(jī)制、藥物開(kāi)發(fā)以及動(dòng)物模型的建立等方面具有重要價(jià)值。01曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)Open Field Test, OFT?用于評(píng)估動(dòng)物的自主運(yùn)動(dòng)行為和探究行為，探究動(dòng)物行為與緊張度。?實(shí)驗(yàn)裝置一般由曠場(chǎng)箱體、攝像系統(tǒng)和視頻記錄分析軟件共同構(gòu)成。?主要評(píng)估指標(biāo)包括…

一文講清楚流式細(xì)胞術(shù)的原理與應(yīng)用

一文講清楚流式細(xì)胞術(shù)的原理與應(yīng)用原創(chuàng) 康旭禾 康旭禾生物 2024年11月12日 19:00 江西流式細(xì)胞術(shù)（Flow Cytometry，F(xiàn)CM）是一種高效的用于單細(xì)胞分析/分選的生物學(xué)技術(shù)，其集細(xì)胞生物化學(xué)技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)、激光技術(shù)、流體力學(xué)、電子技術(shù)、計(jì)算機(jī)技術(shù)、分子生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)等理論于一體。FCM能夠?qū)Υ罅康募?xì)胞或非細(xì)胞顆粒的物理、生理、生化、免疫、遺傳、分子生物學(xué)性狀及功能狀態(tài)等進(jìn)行定性或定量檢測(cè)?，F(xiàn)代流式細(xì)胞儀自問(wèn)世以來(lái)，已歷經(jīng)了40多年的發(fā)展，其被廣泛用于從基礎(chǔ)研究…

干貨分享 | get這些常規(guī)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，高分文章穩(wěn)了（下）

干貨分享 | get這些常規(guī)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，高分文章穩(wěn)了（下）前幾期帶大家了解過(guò)一些常規(guī)的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)【干貨分享 | get這些常規(guī)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，高分文章穩(wěn)了（上）】，相信對(duì)大家課題研究方面還是有一些幫助的，今天再給大家整理一波，一起來(lái)看看吧~細(xì)胞遷移和侵襲在腫瘤發(fā)展過(guò)程中，細(xì)胞進(jìn)入循環(huán)系統(tǒng)的能力是重要的研究對(duì)象。相關(guān)的信號(hào)通路主要可以分為控制細(xì)胞黏附和控制細(xì)胞骨架。細(xì)胞的遷移與侵襲主要與細(xì)胞骨架和黏附相關(guān)。腫瘤細(xì)胞侵襲和遷移能力的改變通常采用Transwell進(jìn)行檢測(cè)。細(xì)胞劃痕也…

國(guó)自然基金設(shè)計(jì)之常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及應(yīng)用舉例

國(guó)自然基金設(shè)計(jì)之常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及應(yīng)用舉例小伙伴們?cè)诨鹪O(shè)計(jì)的時(shí)候，不可避免要設(shè)計(jì)一些動(dòng)物實(shí)驗(yàn)。選擇合適的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物是至關(guān)重要的。目前實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有很多，你們都了解多少呢？下面小編就跟大家分享下常見(jiàn)的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的特點(diǎn)及其應(yīng)用舉例（如果您對(duì)標(biāo)書(shū)依然吃不準(zhǔn)，或者想獲得更多的私人建議，歡迎給我們留言，我們會(huì)免費(fèi)給大家回復(fù)）。1.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：是動(dòng)物，為了生命科學(xué)研究和生物醫(yī)藥發(fā)展，研究和驗(yàn)證。2.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施：為了，動(dòng)物質(zhì)量和動(dòng)物實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可信性，生存環(huán)境進(jìn)行有效控制；…

康旭禾動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)

康旭禾動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)服務(wù)動(dòng)物行為學(xué)實(shí)驗(yàn)是科學(xué)研究中用以觀察和理解動(dòng)物行為的一種手段，常用于評(píng)估動(dòng)物的溝通、情緒表達(dá)、社交、學(xué)習(xí)和繁殖行為等。這些實(shí)驗(yàn)在神經(jīng)科學(xué)、心理學(xué)、醫(yī)學(xué)和藥學(xué)等領(lǐng)域有著廣泛的應(yīng)用，特別是在研究人類(lèi)疾病的發(fā)病機(jī)制、藥物開(kāi)發(fā)以及動(dòng)物模型的建立等方面具有重要價(jià)值。01曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)Open Field Test, OFT?用于評(píng)估動(dòng)物的自主運(yùn)動(dòng)行為和探究行為，探究動(dòng)物行為與緊張度。?實(shí)驗(yàn)裝置一般由曠場(chǎng)箱體、攝像系統(tǒng)和視頻記錄分析軟件共同構(gòu)成。?主要評(píng)估指標(biāo)包括…

一文講清楚流式細(xì)胞術(shù)的原理與應(yīng)用

一文講清楚流式細(xì)胞術(shù)的原理與應(yīng)用流式細(xì)胞術(shù)（Flow Cytometry，F(xiàn)CM）是一種高效的用于單細(xì)胞分析/分選的生物學(xué)技術(shù)，其集細(xì)胞生物化學(xué)技術(shù)、單克隆抗體技術(shù)、激光技術(shù)、流體力學(xué)、電子技術(shù)、計(jì)算機(jī)技術(shù)、分子生物學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)等理論于一體。FCM能夠?qū)Υ罅康募?xì)胞或非細(xì)胞顆粒的物理、生理、生化、免疫、遺傳、分子生物學(xué)性狀及功能狀態(tài)等進(jìn)行定性或定量檢測(cè)。現(xiàn)代流式細(xì)胞儀自問(wèn)世以來(lái)，已歷經(jīng)了40多年的發(fā)展，其被廣泛用于從基礎(chǔ)研究到臨床實(shí)踐的各個(gè)方面，如：分子生物學(xué)、細(xì)胞生物學(xué)…

干貨分享 | get這些常規(guī)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，高分文章穩(wěn)了（上）

干貨分享 | get這些常規(guī)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，高分文章穩(wěn)了（上）細(xì)胞實(shí)驗(yàn)可謂是最基礎(chǔ)也是最重要的實(shí)驗(yàn)體系之一，我們可以通過(guò)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)產(chǎn)生的數(shù)據(jù)制作基礎(chǔ)疾病模型、了解藥物對(duì)細(xì)胞的影響、檢測(cè)信號(hào)通路……細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)操作就像賽跑，你比別人跑的快，就比別人多發(fā)幾篇SCI…掌握這些常規(guī)細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，研究課題也會(huì)進(jìn)展得更加順利哦~細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)細(xì)胞增殖與細(xì)胞凋亡、細(xì)胞周期等是腫瘤研究的重要表型，是分子生物學(xué)和藥理學(xué)研究解決的問(wèn)題之一。通過(guò)在細(xì)胞中過(guò)表達(dá)或干擾某個(gè)基因研究基因?qū)?xì)胞增殖能…