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干貨:細胞培養(yǎng)保姆級實戰(zhàn)攻略
干貨:細胞培養(yǎng)保姆級實戰(zhàn)攻略細胞是生物細胞學實驗的基礎,藥物、基因功能、疾病機理等的相關研究多數(shù)需要在細胞水平進行闡釋。而細胞培養(yǎng),受人員操作和環(huán)境條件的影響比較大,在細胞培養(yǎng)中常常會遇到很多的細節(jié)問題,而每個問題都有可能導致細胞培養(yǎng)的失敗。我們匯總了細胞實驗室多年來的細胞培養(yǎng)經驗分享給大家,希望能給大家的細胞培養(yǎng)提供參考。01細胞系身份需明確 我們之所以選定某種細胞系開展實驗,是因為所選細胞系的一些特性符合研究方向的設定。比如組織特性,疾病特性,…
探尋分子生物學的那些事
引言隨著生命科學研究的深入,研究技術的革新與進步,我們認識了蛋白質和DNA等生物大分子,我們也能深入研究這些生物大分子的結構及其作用。研究生物分子結構和功能的常見技術包括聚合酶鏈式反應、分子印跡雜交技術、酶聯(lián)免疫吸附技術、免疫沉淀技術、RNA干擾技術以及組學技術。本期欄目讓我們一起走近探尋生物分子的那些事,了解分子生物學的基本原理。聚合酶鏈式反應(PCR)是一種用于放大擴增特定的DNA片段的分子生物學技術。其基本原理是利用DNA在體外加熱至95°高溫時變性會變成單…
蛋白實驗干貨-蛋白提取-蛋白定量-實驗步驟-問題處理
一、 產品用途 一、WB實驗介紹 “ Western Blot WB(Western Blot,蛋白免疫印跡)是一種常規(guī)的蛋白分析技術,常用于鑒定某種蛋白,并能對蛋白進行定性和半定量分析。WB實驗的基本核心理念是抗原抗體的特異性反應,通過變性膠 SDS-PAGE 將不同分子量的蛋白質分離開,然后轉移到固相載體 PVDF 膜上,再用脫脂牛奶作為封閉液進行封閉和一抗稀釋液進行稀釋。待目的蛋白和抗體充分結合后,用 TBST 洗脫液洗脫掉多余未結合的一抗,加入帶有 HRP 標記的對應二抗,這樣,我們的蛋…
病理實驗
提起病理,相信大家都不會感到陌生,對于眾多生命科學的科研工作者來說,病理學在科研工作中更是扮演著重要的角色。今天小編就為大家梳理一下在科研工作中常用到的病基本介紹病理學從研究對象區(qū)分,可以分為人體病理學和實驗病理學,作為科研工作者,實驗病理學是我們研究的主要方向。實驗病理學以實驗動物模型、體外培養(yǎng)細胞、組織和器官為研究對象。動態(tài)的研究人體疾病的發(fā)生發(fā)展規(guī)律。實驗病理學的整體技術小編歸納為兩大類,一是制片技術、另一是染色技術。下面將從這兩個方向為大…
【全網最全】實驗動物生理生化指標參考
實驗動物生理生化—— Physiology and Biochemistry ——實驗動物生理生化數(shù)據對于評估實驗動物的器官功能或損傷改變情況起著決定性或提示性作用。小編搜集了很多信息,整理了一份關于常用實驗動物相關指標的干貨內容,具體如下:實驗動物臟器重量值表(臟器均為%) 常用實驗動物生理指標Animal physiological indicators常用實驗動物基本信息Basic information of animals實驗動物排便排尿量表Animal defecation and urination scale實驗動物飼料量、飲水量、產熱量表Heat generation m…
精彩回顧|江西省生物化學與分子生物學會成立40周年紀念大會議圓滿落幕
2024年7月5日-8日,為慶祝江西省生物化學與分子生物學會成立四十周年,回顧學會發(fā)展歷史,弘揚科學家精神,探討發(fā)展生產力,搭建會員交流平臺,展示江西省生化與分子生物學學科成果在江西九江隆重舉辦,邀請了多位行業(yè)重量級嘉賓,匯集了科研院所、醫(yī)療機構、科研儀器設備、生物技術和服務企業(yè)等權威專家與產業(yè)先鋒等多名參會人員??敌窈躺锸苎麉⒓颖敬未髸?,并帶來動物實驗、細胞實驗、分子實驗、病理實驗、流式檢測實驗等相關的各項技術服務整體解決方案等最新產品技術,引起眾多…
如何不被實驗室當“韭菜”!如何選擇靠譜的實驗室外包公司?
國家對于科學研究越來越重視,醫(yī)生以及科研工作者可以獲得更多相關實驗課題的資助,國內的科研環(huán)境也是越來越好,對于科研實驗以及科研工作者自身素質要求也越來越高,礙于很多科研工作者工作單位基礎設施不完善、臨床工相關教學工作任務繁重,無暇顧及自身科研課題,實驗外包行業(yè)由此誕生。對于國內的工作者來說,實驗外包行業(yè)可能是一個新興的行業(yè),對于國外的科研工作者,早已屢見不鮮,在五六十年代,實驗外包行業(yè)在國外已經興起。我國的實驗外包行業(yè)雖然起步較晚,但是發(fā)展迅速,…
火熱的多組學 ?
多組學是什么? 多組學(Multi-Omics),也稱為集成組學、泛組學和跨組學,旨在整合兩個或多個組學數(shù)據集,進行數(shù)據分析、可視化和解釋,以明確某種生物過程的機制。是一種探究機體多種物質相互作用的一種方法,目前包括基因組學、表觀基因組學、轉錄組學、蛋白質組學、代謝組學、微生物組學等。 常見組學概念 1基因組學基因組學(genomics)的概念最早于1986年由美國遺傳學家Thomas H. Roderick提出?;蚪M學是對生物體所有基因進行集體表征、定量研究及不同基因組比較研究的一門交…
動物造模,該怎樣選擇實驗動物?
動物造模,該怎樣選擇實驗動物?實驗不選什么動物催吐實驗不選用大小鼠,因為小/大鼠無嘔吐反應 膽囊功能實驗不選用大鼠,因為大鼠無膽囊發(fā)汗中藥的研究不能選用小鼠(無汗腺)慢性支氣管炎的實驗不能選用大/小鼠,因為小/大鼠氣管及支氣管腺不發(fā)達
糟心的實驗做不來怎么辦?實驗外包真香
糟心的實驗做不來怎么辦?實驗外包真香對于實驗來說,方案才是精髓和核心價值,會設計實驗方案,分析實驗結果的是大佬,會做實驗的,那是實驗員。所以,找靠譜的科研機構外包實驗,已經是大勢所趨.什么情況下可以選擇實驗外包??實驗耗時非常多,周期較長,這時候就可以將不重要耗時的實驗外包出去,從而加快我們整體實驗的進度;需要迅速完成課題的,那么整體性外包是很適合的,可以在短時間完成實驗獲取實驗數(shù)據,得到SCI論文的寫作素材。?有些儀器在借不到的情況下,使用頻率不高…
流式細胞周期檢測的那些問題
樣本制備注意事項1、根據不同的檢測細胞調整合適的溫度、濕度、酸堿度等培養(yǎng)環(huán)境,注意一定要無菌的環(huán)境培養(yǎng)。2、培養(yǎng)細胞時,以對數(shù)期處理為宜,避免細胞量過少導致收集細胞量不足或者細胞量過多導致細胞開始大量死亡造成的實驗誤差。3、流式檢測細胞周期上機檢測所需收集細胞量較多,收集細胞時盡量多收集一些4、流式檢測對細胞離心,重懸次數(shù)較多,注意動作輕緩,避免過多地損傷、弄破細胞。5、本實驗對細胞離心,重懸次數(shù)較多,注意動作輕緩,避免過多地損傷細胞。6、細胞周期待測…
免疫組化背景問題分析及解決方案!
1.蛋白質疏水相互作用產生的背景在水性介質中,當大分子的表面張力低于水的表面張力時,就會發(fā)生疏水相互作用。疏水力是成功結合Ag-Ab的關鍵,但它們也會產生不可接受的背景。由于相鄰組織蛋白內部和之間反應性ε和α-氨基酸的交聯(lián),通過與含醛固定劑固定,組織蛋白變得更疏水。固定過程中蛋白質疏水性的增加增加了免疫組織化學程序中的背景染色;因此,應避免長時間固定在福爾馬林或其他醛類固定劑中。這種過度固定引起的背景染色可以通過使用Bouin固定劑、Zenker固定劑或B5固定劑進行…
細胞遷移實驗影響因素匯總
細胞遷移實驗是研究細胞在不同條件下的遷移能力的一種常用實驗方法。以下是小編整理的關于細胞遷移實驗的注意事項:細胞遷移實驗注意事項1.細胞處理在進行細胞遷移實驗前,應對需要檢測遷移能力的細胞進行處理,如培養(yǎng)、傳代、酶消化等。同時還需注意控制每次處理時間和方法的一致性,以保證實驗結果的可靠性。2. 細胞計數(shù)在進行實驗時,應精確計算每個實驗組的細胞數(shù)。這可以通過顯微鏡下的視覺觀察或使用細胞計數(shù)儀來完成。正確的細胞計數(shù)可以幫助進行實驗設計和數(shù)據分析。3. 實驗…
實驗干貨 | qPCR實驗中經常忽略的實驗細節(jié)!
在實驗室的日常實驗中,每一個細節(jié)都可能對結果產生重要影響,尤其是在進行實時熒光定量PCR(qPCR)實驗時更是如此。繁忙的實驗過程中,我們往往容易忽略一些看似微不足道但卻至關重要的步驟。因此,不妨讓我們一起回顧并重視那些常常被忽略的實驗細節(jié),確保實驗結果的準確性和可靠性。01如何評判RNA質量?評判RNA質量是分子生物學實驗中的一個關鍵步驟,尤其在涉及RNA測序、cDNA合成、qPCR等實驗時,RNA的質量直接影響到實驗結果的可靠性和準確性。以下是評判RNA質量的主要方法和步驟:…
?裸鼠成瘤實驗經驗分享
裸鼠成瘤實驗經驗分享
是誰還分不清PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR!
是誰還分不清PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR!PCR、qPCR、RT-PCR和RT-qPCR這四種技術都是基于聚合酶鏈式反應(PCR)的技術,但是它們之間存在一些區(qū)別。先來講講些四胞胎的概念:PCR:聚合酶鏈式反應(PCR)是一種體外擴增DNA分子的技術,利用DNA聚合酶和多個引物在所需溫度下擴增目標DNA分子。PCR反應分為三個階段:預變性、變性-退火-延伸和延伸。PCR技術主要用于DNA序列的擴增和檢測,應用廣泛,如基因克隆、DNA序列測定等。qPCR:實時定量聚合酶鏈式反應(qPCR)是一種實時檢測PCR過程…
生物實驗小白必備:細胞劃痕實驗步驟詳解
生物實驗小白必備:細胞劃痕實驗步驟詳解除了transwell外,我們還可以用細胞劃痕實驗(cell ctratch test或wound healing assay)驗證細胞遷移能力。1.培養(yǎng)板劃線標記:通常隔0.5-1cm劃線,至少3條線;2.細胞鋪板:每孔接種5x105個細胞,數(shù)量可根據狀態(tài)調整,但一定要鋪勻(十字法或8字法)3.細胞劃線:200ul槍頭垂直橫線劃線,盡量保證力度一致;4.去除劃下細胞:PBS洗滌2-3次,然后換無血清或低血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞,根據實驗目的進行藥物處理或其他;5.觀察與計數(shù):放入37攝氏度5%CO…
康旭禾生物實驗服務匯總
康旭禾生物實驗服務匯總|有找我做實驗的嗎,在線等
1 2 3 為什么做動物實驗需要分組
為什么做動物實驗需要分組1、統(tǒng)計學要求:在動物實驗中,樣本量的大小對于實驗結果的準確性和可靠性至關重要。統(tǒng)計學上要求一般至少每組有6個可用數(shù)據才有意義,這樣可以確保實驗結果的穩(wěn)定性和可信度。然而,在某些特定的檢測(如檢測組織中基因或蛋白表達時),每組動物數(shù)量在3到6只或以上即可滿足統(tǒng)計學分析要求。2、避免個體差異:每只動物在遺傳、環(huán)境、生理等方面都可能存在差異,這些差異可能會影響到實驗結果。通過分組并每組使用多只動物,可以減少由于個體差異導致的實驗誤差…
如何做好β-半乳糖苷酶染色!
結果β-半乳糖苷酶染色(β-Galactosidase Staining)是一種常用的細胞或組織活性檢測方法。這種染色方法基于衰老時SA-β-Gal(senescence-associated β-galactosidase)活性水平上調,可以對衰老細胞或組織進行染色檢測。在普通的光學顯微鏡下就可以觀測到細胞或組織的衰老情況。不同類型樣本實驗操作1. 細胞樣本染色1 貼壁細胞① 對于 6 孔板中培養(yǎng)的細胞,吸除細胞培養(yǎng)液,用 PBS 或 HBSS 洗滌 1 次,加入 1 ml 染色固定液,室溫固定 15 分鐘。② 吸除固定液,用 PBS 或 HBSS 洗滌…