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SCI文獻解讀 | 多組學(xué)聯(lián)用方案用途、優(yōu)勢大總結(jié)！南京大學(xué)醫(yī)學(xué)院IF 9.4文章應(yīng)用思路分享~

多組學(xué)技術(shù)聯(lián)用，近年來幾乎是高分文章，尤其是涉及醫(yī)學(xué)、機制研究的高分文章比較常見的思路框架了。的確，隨著近幾年多組學(xué)技術(shù)的不斷更新迭代，層出不窮的新技術(shù)不僅豐富了檢測對象種類，也提高檢測的速度、準確度、覆蓋度……在此基礎(chǔ)上的多組學(xué)聯(lián)用實驗方案，對于提高文章的邏輯性、可靠性和完成度都有非常大的幫助。但這也造成了一個很多科研工作者，尤其是高分文章發(fā)文經(jīng)驗不足的研究者常見困惑：這么多種技術(shù)，我該選什么？下面，小編就為大家梳理一下幾項常見的多組學(xué)技術(shù)聯(lián)用…

腫瘤微環(huán)境在腫瘤的發(fā)生發(fā)展治療過程中有何影響？

近三十年來，腫瘤治療領(lǐng)域在免疫療法、靶向藥物及聯(lián)合治療方案的推動下實現(xiàn)了突破性進展。然而臨床數(shù)據(jù)顯示，超過80%的治療方案難以實現(xiàn)完全治愈，即使獲得顯著初期療效的病例也常面臨腫瘤復(fù)發(fā)和耐藥性轉(zhuǎn)化的問題。值得注意的是，近年研究證實腫瘤微環(huán)境（TME）在腫瘤耐藥、免疫逃逸及轉(zhuǎn)移擴散等腫瘤進展中具有決定性作用。什么是腫瘤微環(huán)境？腫瘤微環(huán)境是由腫瘤細胞及其周邊基質(zhì)共同構(gòu)成的動態(tài)生態(tài)系統(tǒng)，包括多種類型的基質(zhì)細胞（成纖維細胞、淋巴細胞、巨噬細胞和內(nèi)皮細胞）、免疫細…

【國自然熱點推薦】鐵自噬 | 鐵死亡的好兄弟

毋庸置疑，鐵死亡已然成為國自然關(guān)注的大熱點。小編今天另辟蹊徑，帶大家看看鐵死亡的好兄弟“鐵自噬（Ferritinophagy）”有沒有借著大哥的聲望站起來~鐵自噬國自然研究現(xiàn)狀鐵自噬作為國自然研究的新方向，近三年中標率不斷攀升。2023年鐵自噬相關(guān)中標項目已達10篇以上，涉及肺纖維化、慢阻肺、復(fù)發(fā)性自然流產(chǎn)、骨關(guān)節(jié)炎、腫瘤、腎損傷和肝損傷等多種疾病類型。玩轉(zhuǎn)國自然的大佬們也緊跟當(dāng)前研究潮流，將鐵自噬和鐵死亡、相分離、免疫等研究熱點進行交互機制研究，屬實是掌握了國自然的…

細胞分選寶典：流式分選

流式分選通過不同的熒光素標記樣本中一種或多種細胞，再經(jīng)由流式細胞儀區(qū)別不同細胞的光散射和熒光特征，將不同細胞分離。流式分選的步驟相對來說比較固定：制備單細胞懸液；細胞染色；細胞分選；后續(xù)細胞培養(yǎng)、分析。其中比較困難的就是關(guān)于抗體偶聯(lián)熒光素的選擇：比如，已經(jīng)確定好了要分選細胞的marker，但是偶聯(lián)的熒光素不知道怎么選。一般來說需要遵循三個原則：01根據(jù)儀器配置選擇熒光素：多色標記熒光素搭配時還應(yīng)當(dāng)每個通道只選擇一種熒光素；各個通道之間的熒光素可以互相搭配…

【病理干貨】HE染色法方法介紹及與常見問題分析

蘇木精 — 伊紅染色法 ，簡稱HE染色法 ，石蠟切片技術(shù)里常用的染色法之一 。蘇木精是陽離子染料，能夠?qū)⒓毎藘?nèi)的嗜堿性物質(zhì)染成藍紫色。伊紅是陰離子染料，能夠?qū)⒓毎|(zhì)和膠原纖維等染成粉紅色。HE染色法是組織學(xué)、胚胎學(xué)、病理學(xué)教學(xué)與科研中最基本、使用最廣泛的技術(shù)方法。HE染色法的原理是怎么樣的？●細胞核染色原理蘇木精為堿性天然染料，可使細胞核著色。細胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA，在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA雙螺旋的外側(cè)帶負電荷，呈酸性…

【國自然熱點推薦】細胞衰老研究思路 | 關(guān)鍵機制錦上添花

自Leonard Hayflick提出“細胞衰老”這一概念，相關(guān)研究逐漸進入科研視線?！暗挚顾ダ稀薄ⅰ伴L生不老”更是從兩千多年前延續(xù)至今的話題。那么什么是衰老（Aging），什么又是細胞衰老（Cellular senescence）呢？二者等同嗎？衰老不利于機體健康的話，細胞衰老一定是百害無一利的嗎？接下來由小編為您一一揭秘！走進細胞衰老衰老是生命體生理功能隨時間推移及環(huán)境變化出現(xiàn)衰退的生理過程，是個體走向自然死亡的必經(jīng)之路。細胞衰老則是指細胞處于一種穩(wěn)定的細胞周期停滯狀態(tài)，是衰老的復(fù)…

超詳細！動物行為學(xué)——Morris水迷宮實驗的影響因素有哪些？

Morris水迷宮（Morriswatermaze）實驗于1981年由英國心理學(xué)家RichardGMorris設(shè)計，最初用于研究大鼠的空間學(xué)習(xí)記憶功能，此后被不斷地完善和改進，逐漸成為研究學(xué)習(xí)記憶最常用的實驗方法之一。目前Morris水迷宮實驗在國內(nèi)外已得到普遍認可，成為應(yīng)用最廣泛的研究和評價動物空間學(xué)習(xí)記憶能力的經(jīng)典行為學(xué)實驗。影響水迷宮實驗結(jié)果的因素一般涉及幾方面，實驗裝置，實驗環(huán)境，動物種類等。實驗裝置Morris水迷宮實驗裝置通常組成部分： 水箱及底部加熱器： 實驗中可將水溫恒定在20-26度對…

【干貨】HE染色實驗步驟及常見問題解析

HE染色全名為蘇木精(hematoxylin)和伊紅(eosin)染色方法，是最基本的也是最重要的病理學(xué)染色技術(shù)。HE切片是病理醫(yī)生得以做出正確診斷的關(guān)鍵。HE染色是目前國內(nèi)外病理診斷上廣泛采用的 常規(guī)染色方法。切片質(zhì)量的好壞，可直接影響疾病診斷的及時與準確性。因此，能制作出一張高質(zhì)量的HE染色切片，是必須掌握的技術(shù)之一。01染色原理1.細胞核染色原理：蘇木精為堿性天然染料，可使細胞核著色。細胞核內(nèi)染色質(zhì)的成分主要是DNA，在DNA的雙螺旋結(jié)構(gòu)中，兩條核苷酸鏈上的磷酸基向外，使DNA雙螺…

獨家整理：銅死亡檢測方法

21世紀是生命科學(xué)迅速發(fā)展的世紀。作為科研人員，不僅要腳踏實地、心無旁騖，還要“眼觀六路，耳聽八方”，實時掌握科研動態(tài)。今天小編要說的是銅死亡（Cuproptosis），想必大家對銅死亡并不陌生，畢竟它的問世，可以說是掀起了學(xué)術(shù)界一片巨浪。但小伙伴們真的了解銅死亡嗎？沒關(guān)系，小編馬上就會讓你好好熟識“它”。銅（Cu）是一種重要的膳食微量營養(yǎng)素，包括Cu+（還原型）和Cu2+（氧化型）兩種離子形式參與細胞生理功能的酶促調(diào)節(jié)。那么Cu是怎么進入細胞發(fā)揮功能的呢？第一步，在進…

【國自然熱點推薦】細胞焦亡｜經(jīng)典細胞死亡方式如何玩出新花樣

細胞固有一死，其死亡方式可謂絢麗多彩，讓人眼花繚亂。在眾多細胞死亡方式之中，小編發(fā)現(xiàn)，“細胞焦亡”作為出道20多年的“老演員”，在最近幾年不斷沖擊國自然“熱搜榜單”，實力不容小覷（圖1）。這是如何做到的呢？今天，就由小編來和大家嘮嘮細胞焦亡，看看是怎么個事兒~圖1 細胞焦亡相關(guān)國自然項目中標情況（數(shù)據(jù)來源：ZCOOL國自然科學(xué)基金查詢平臺）老規(guī)矩，讓我們先來回顧一下細胞焦亡相關(guān)的小知識~

一文搞定IP、CoIP、CHIP、RIP

實驗名稱雖相撞，看我如何巧分辨。IP、CoIP、CHIP、RIP傻傻分不清？別著急，看完這篇你就懂了，包教包會！我們先掌握共性部分，再記住區(qū)分要點，這樣就可以啦！免疫沉淀（IP）免疫沉淀（Immunoprecipitation，IP）是一種研究蛋白質(zhì)間交互作用的生物技術(shù)，這種技術(shù)是將蛋白質(zhì)視為抗原，并利用抗體與之進行特異性結(jié)合的特性，來進行研究。這項技術(shù)可用來將含有上千種不同蛋白質(zhì)的樣品中，分離和濃縮出特定蛋白質(zhì)。進行免疫沉淀法時，抗體需要和一個受質(zhì)結(jié)合。IP的實驗原理很簡單，就和“…

旋轉(zhuǎn)？跳躍？小鼠的異常行為

小鼠刻板行為Stereotypical behavior of mice.小鼠在繁育過程中經(jīng)常會出現(xiàn)大量的問題，有些是人為操作不當(dāng)，有些則是小鼠自發(fā)性問題，而我們在做實驗的過程中，經(jīng)常會發(fā)現(xiàn)小鼠會在籠子里“旋轉(zhuǎn)”“跳躍”，這究竟是由哪些原因?qū)е碌哪?？讓我們一起看下去吧。小鼠刻板行為指的是一種固定且重復(fù)的行為模式，通常表現(xiàn)為一些無意義或無目的的動作，例如上述提到的，小鼠在同一位置不停地轉(zhuǎn)圈、追趕自己的尾巴，或者是小鼠在籠內(nèi)拐角處不停地原地跳躍，又或者是小鼠不停地在籠內(nèi)上下翻轉(zhuǎn)等等…

如何用流式細胞術(shù)檢測線粒體膜電位，質(zhì)量以及ROS水平？

線粒體——細胞的“能量中樞”與“命運開關(guān)”在微觀的細胞世界中，線粒體不僅是制造能量的“發(fā)電廠”（95%的ATP由此產(chǎn)生），更是調(diào)控生死決策的“指揮中心”。當(dāng)線粒體功能健全時，它們通過膜電位（ΔΨm） 驅(qū)動ATP合成、鈣穩(wěn)態(tài)與信號傳導(dǎo)；一旦功能崩潰（如凋亡、疾病中），則會觸發(fā)活性氧（ROS）爆發(fā)與線粒體網(wǎng)絡(luò)解體——這些變化如同細胞命運的“早期警報”。為什么需要精準檢測線粒體？1. 功能監(jiān)控（ΔΨm）：? 膜電位是線粒體健康的“電壓表”，其崩潰（如JC-1紅綠比↓或TMRE熒光…

重磅綜述！Nature頂級子刊（IF：113.915）|自噬研究沒有新思路，一文了解

自噬是一個吞噬自身細胞質(zhì)蛋白或細胞器并使其包被進入囊泡，并與溶酶體融合形成自噬溶酶體，降解其所包裹的內(nèi)容物的過程，借此實現(xiàn)細胞本身的代謝需要和某些細胞器的更新。今天小編分享一篇發(fā)表在《Nature reviews Molecular cell biology》雜志上的關(guān)于自噬的綜述文章，IF:113.915。摘要維持蛋白質(zhì)穩(wěn)態(tài)和細胞器完整性和功能對于細胞穩(wěn)態(tài)和細胞活力至關(guān)重要。自噬是介導(dǎo)將各種細胞貨物運送到溶酶體以進行降解和回收的主要機制。大量研究表明自噬對疾病具有重要的保護作用。然而，在癌癥…

大（?。┓肿拥鞍譝B如何跑出漂亮條帶？這幾個步驟一定要優(yōu)化！

Western Blot作為基礎(chǔ)生命科學(xué)檢測方法之一，目前已經(jīng)有適配性較高的通用型實驗檢測方案和流程。但蛋白質(zhì)作為一個特異性較強的檢測指標，總會有一些并不適用于常規(guī)方法，且需要我們對實驗步驟進行優(yōu)化或者修改，才能保證得到較為理想的結(jié)果。如果你研究的蛋白分子量較大或較小，且苦于一直跑不出好看的WB結(jié)果，那么這篇文章一定可以幫到你！WB實驗一般流程什么是大/小分子蛋白1）大分子蛋白大分子蛋白一般指WB檢測中分子量＞200kDa的蛋白質(zhì)，由于其分子量大，遷移速度慢，轉(zhuǎn)膜困難等特…

疾病動物模型-心肌梗死模型

在醫(yī)學(xué)研究中，心肌梗死模型是一種重要工具，能夠幫助科學(xué)家深入理解心肌梗塞的病理生理機制和治療方法的發(fā)展。通過模擬心肌梗塞的發(fā)生過程，研究人員可以更精確地探索疾病的發(fā)病機制、評估治療效果，進而推動臨床實踐的進步。本文將從心肌梗死的疾病背景出發(fā)，詳細探討其發(fā)病機制，綜述近年來在動物模型方面的研究進展，重點介紹小鼠心肌梗死模型的手術(shù)步驟及操作要點，并對模型的表型評價方法進行詳細分析，旨在為相關(guān)研究提供參考。心肌梗死疾病背景心肌梗死（myocardial infarctio…

【國自然熱點推薦】巨噬細胞胞外誘捕網(wǎng)現(xiàn)狀+機制+實驗 | 一文統(tǒng)統(tǒng)搞定！

巨噬細胞極化、巨噬細胞鐵死亡、巨噬細胞代謝重編程、巨噬細胞吞噬、巨噬細胞遷移……小編想一定是這些研究熱點的堆積，才一步步把巨噬細胞送上“國自然榜一”的地位~在這些研究熱點中，有一個隱藏頗深的熱點可能很多小伙伴們還沒發(fā)現(xiàn)，今天小編把它揪出來“公之于眾”，讓更多小伙伴們知道，巨噬細胞竟還會“布下天羅地網(wǎng)”！噔~噔~噔~今天的重磅推薦——巨噬細胞胞外誘捕網(wǎng)（Macrophage Extracellular Traps，METs）來啦！巨噬細胞胞外誘捕網(wǎng)——研究現(xiàn)狀深知大家時間寶貴，小編直接…

一文拯救 WB 實驗！Western blot 內(nèi)參選擇避坑全攻略

一、常見的內(nèi)參抗體 1.β-actin（42 kDa）特點：β-actin 是細胞骨架的重要組成部分，廣泛存在于大多數(shù)細胞和組織中，其表達相對穩(wěn)定，且與眾多目標蛋白的分子量差異較大，便于在 Western blot 實驗中區(qū)分。局限性：在肌肉組織中，β-actin 的高表達可能影響內(nèi)參的準確性。此外，其聚合狀態(tài)易受細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的影響，從而導(dǎo)致表達水平發(fā)生變化。因此，在肌肉組織相關(guān)研究或涉及細胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)的實驗中，建議優(yōu)先選擇其他內(nèi)參抗體，如 GAPDH 或 β-tubulin。2.GAPDH（36 kDa）特點：GAPDH…

告別玄學(xué)！一文搞懂 PCA 降維原理+ 避坑指南

生物醫(yī)學(xué)研究的浩瀚海洋中，我們常常面臨著海量且高維度的數(shù)據(jù)洪流。以基因數(shù)據(jù)為例，每一個樣本都承載著成千上萬個基因的測量指標，每一個基因都宛如一個獨特的特征維度，共同構(gòu)成了一個復(fù)雜龐大的多維數(shù)據(jù)空間。然而，人類的認知能力在面對如此高維度的數(shù)據(jù)時，往往顯得力不從心，難以直觀地洞察樣本之間的內(nèi)在差異與聯(lián)系。此時，主成分分析（PCA，principal component analysis）便如同一座明亮的燈塔，為我們在數(shù)據(jù)的迷霧中指引方向。PCA 是一種經(jīng)典的降維方法，其核心理念在于從眾…

細胞遷移 / 侵襲實驗全攻略

細胞遷移和侵襲是生物學(xué)研究中常見的現(xiàn)象，也是疾病發(fā)展過程中重要的環(huán)節(jié)。細胞遷移/侵襲實驗作為一種常用的生物醫(yī)學(xué)實驗，旨在評估細胞的侵襲和遷移能力，尤其是對細胞在模擬體內(nèi)的生理環(huán)境下的行為進行模擬和觀察，一般在腫瘤惡性化表型研究中最常見。因為在腫瘤治療中，普遍認為抑制腫瘤細胞遷移和侵襲是有效的治療手段。因此在對腫瘤細胞進行干預(yù)（過表達、敲低、敲除、點突變、藥物處理）后對細胞的遷移與侵襲能力進行檢測，可以作為評估干預(yù)效果的一個有效指標。No.1細胞遷移/侵…