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線粒體——細(xì)胞的“能量中樞”與“命運(yùn)開關(guān)”

在微觀的細(xì)胞世界中，線粒體不僅是制造能量的“發(fā)電廠”（95%的ATP由此產(chǎn)生），更是調(diào)控生死決策的“指揮中心”。當(dāng)線粒體功能健全時(shí)，它們通過膜電位（ΔΨm） 驅(qū)動(dòng)ATP合成、鈣穩(wěn)態(tài)與信號(hào)傳導(dǎo)；一旦功能崩潰（如凋亡、疾病中），則會(huì)觸發(fā)活性氧（ROS）爆發(fā)與線粒體網(wǎng)絡(luò)解體——這些變化如同細(xì)胞命運(yùn)的“早期警報(bào)”。

為什么需要精準(zhǔn)檢測(cè)線粒體？

1. 功能監(jiān)控（ΔΨm）：

? 膜電位是線粒體健康的“電壓表”，其崩潰（如JC-1紅綠比↓或TMRE熒光↓）是凋亡/壞死的最早標(biāo)志。

2. 結(jié)構(gòu)評(píng)估（質(zhì)量）：

? MitoTracker Green FM標(biāo)記總線粒體池，揭示線粒體數(shù)量增減與形態(tài)異變（腫脹/碎片化），是“細(xì)胞器人口普查”的金標(biāo)準(zhǔn)。

3. 危機(jī)預(yù)警（ROS）：

? DCFH-DA捕捉整體氧化風(fēng)暴，MitoSOX Red精準(zhǔn)定位線粒體超氧陰離子，為氧化損傷提供“分子雷達(dá)”。

一、線粒體膜電位檢測(cè)

線粒體膜電位（ΔΨm）是維持線粒體功能（如ATP合成、鈣離子緩沖、活性氧產(chǎn)生和凋亡信號(hào)傳導(dǎo)）的關(guān)鍵驅(qū)動(dòng)力。檢測(cè)其變化對(duì)于研究細(xì)胞能量代謝、細(xì)胞凋亡、神經(jīng)退行性疾病、心血管疾病、癌癥等至關(guān)重

JC-1染料

核心原理：濃度依賴的熒光轉(zhuǎn)換

? JC-1 是一種獨(dú)特的“雙發(fā)射”親脂性陽離子染料。? 低 ΔΨm（或低染料濃度）時(shí)： JC-1 主要以單體形式存在于細(xì)胞質(zhì)中，發(fā)出綠色熒光（最大激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)約 510 nm / 527 nm）。? 高 ΔΨm 時(shí)： 由于線粒體基質(zhì)帶負(fù)電，帶正電的JC-1 被大量攝取并在線粒體基質(zhì)內(nèi)積累。當(dāng)濃度足夠高時(shí)，JC-1 分子會(huì)聚集成 J-聚集體 (J-aggregates)。J-聚集體發(fā)出紅色熒光（最大激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)約 585 nm / 590 nm）。? 關(guān)鍵指標(biāo)： 檢測(cè)的是 紅色熒光（聚集體）與綠色熒光（單體）的強(qiáng)度比值 (Red/Green Ratio)。這個(gè)比值與ΔΨm 高度正相關(guān)：比值越高，ΔΨm 越高；比值越低，ΔΨm 越低。

主要優(yōu)點(diǎn)：

1. 比值法抗干擾性強(qiáng)： 這是JC-1最大的優(yōu)勢(shì)。比值測(cè)量能有效抵消因細(xì)胞大小、形狀、染料裝載效率、探針濃度、儀器設(shè)置（如激光功率、PMT電壓）差異以及光程差異（在顯微鏡下）等因素引起的誤差。結(jié)果更可靠，定量性更好。2. 可視化清晰： 在熒光顯微鏡下，高ΔΨm的細(xì)胞/線粒體呈現(xiàn)明亮的紅色（聚集體）和較弱的綠色（單體）；低ΔΨm時(shí)則呈現(xiàn)明亮的綠色（單體）和微弱的紅色（或無紅色）。這種顏色變化非常直觀，易于識(shí)別細(xì)胞群體內(nèi)或單個(gè)細(xì)胞內(nèi)的異質(zhì)性（如凋亡細(xì)胞vs健康細(xì)胞）。3. 廣泛用于凋亡研究： ΔΨm崩潰是細(xì)胞凋亡早期的關(guān)鍵事件，JC-1比值下降是檢測(cè)凋亡啟動(dòng)的經(jīng)典標(biāo)志。

主要缺點(diǎn)：

1. 優(yōu)化要求高： 探針濃度、孵育時(shí)間、溫度必須針對(duì)每種細(xì)胞類型嚴(yán)格優(yōu)化。濃度過低無法形成足夠聚集體，濃度過高可能導(dǎo)致單體熒光飽和或非特異性染色。2. 聚集體形成動(dòng)力學(xué)： J-聚集體的形成并非瞬間完成，且在某些細(xì)胞類型或條件下（如線粒體膜成分改變）可能不完全，影響比值準(zhǔn)確性。3. 光穩(wěn)定性相對(duì)較差： 相較于TMRE，JC-1（尤其是紅色聚集體）更容易發(fā)生光漂白，在長(zhǎng)時(shí)間活細(xì)胞成像或需要高激光強(qiáng)度的共聚焦成像中受限。4. 光譜串?dāng)_： 需要仔細(xì)設(shè)置濾光片，確保綠色和紅色通道之間有良好的分離，避免串色（Bleed-through）。5. 潛在毒性： 較高濃度或長(zhǎng)時(shí)間孵育可能對(duì)某些細(xì)胞有毒性。

典型應(yīng)用：

? 流式細(xì)胞術(shù)高通量檢測(cè)細(xì)胞群體ΔΨm變化（如藥物篩選、毒性測(cè)試）。? 熒光顯微鏡（尤其是寬場(chǎng)）觀察ΔΨm在細(xì)胞群體或單個(gè)細(xì)胞內(nèi)的分布和異質(zhì)性。? 細(xì)胞凋亡的早期檢測(cè)（核心應(yīng)用）。? 評(píng)估線粒體功能狀態(tài)。

TMRE染料

核心原理：電位依賴的熒光積累

? TMRE 是一種單發(fā)射的親脂性陽離子染料（屬于羅丹明家族）。? 其熒光強(qiáng)度（橙紅色，最大激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)約 550nm / 576 nm）直接與線粒體攝取積累的染料量成正比。? 由于染料積累量由線粒體內(nèi)膜兩側(cè)的電位差（ΔΨm）驅(qū)動(dòng)（遵循能斯特方程），因此熒光強(qiáng)度（平均熒光強(qiáng)度 - MFI）與 ΔΨm 正相關(guān)：熒光越強(qiáng)，ΔΨm 越高；熒光越弱，ΔΨm 越低。

主要優(yōu)點(diǎn)：

1. 優(yōu)異的光穩(wěn)定性： TMRE 的光穩(wěn)定性非常好，特別適合長(zhǎng)時(shí)間的活細(xì)胞動(dòng)態(tài)成像，尤其是在共聚焦顯微鏡或高內(nèi)涵成像系統(tǒng)上進(jìn)行時(shí)間序列拍攝（Time-lapse）。2. 低細(xì)胞毒性： 在推薦的工作濃度下，TMRE 對(duì)細(xì)胞的毒性通常很低，對(duì)細(xì)胞生理狀態(tài)干擾小，是活細(xì)胞成像的首選之一。3. 泄漏速率較慢：TMRE 從線粒體中泄漏的速度較慢，能更好地維持穩(wěn)態(tài)熒光信號(hào)，利于動(dòng)力學(xué)觀察。4. 使用相對(duì)簡(jiǎn)單： 原理直觀，操作流程相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)化。5. 適合高分辨率成像： 與共聚焦、雙光子顯微鏡兼容性好，能提供清晰的線粒體亞細(xì)胞定位圖像。

主要缺點(diǎn)：

1. 依賴絕對(duì)熒光強(qiáng)度： 這是單色探針的主要局限。熒光強(qiáng)度受多種因素影響：

? 染料濃度： 必須精確控制并保持一致。? 裝載效率： 受細(xì)胞類型、活力、孵育條件影響。? 細(xì)胞大小/形態(tài)/線粒體數(shù)量： 大細(xì)胞或線粒體豐富的細(xì)胞本底熒光更高。? 儀器設(shè)置： 激光功率、PMT增益、曝光時(shí)間等直接影響讀數(shù)。? 光程/聚焦： 顯微鏡下不同焦平面或細(xì)胞厚度影響光強(qiáng)度。

2. 嚴(yán)格的對(duì)照需求： 為了準(zhǔn)確解釋結(jié)果，必須設(shè)置有效的陽性和陰性對(duì)照：

? 陰性對(duì)照 (ΔΨm 完全崩潰)： 通常在實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)加入線粒體解偶聯(lián)劑（如 CCCP 或 FCCP，常用濃度 10-50 μM，孵育 5-30 分鐘），使所有細(xì)胞的熒光降至最低基線水平（代表背景/非電位依賴的染色）。實(shí)驗(yàn)中細(xì)胞的MFI需要與這個(gè)對(duì)照值比較。? 陽性對(duì)照/未處理組： 健康細(xì)胞作為高ΔΨm的基準(zhǔn)。

3. 無法直觀顯示異質(zhì)性

? 不像JC-1有顏色變化，TMRE的單色信號(hào)在顯微鏡下不易直接目視區(qū)分ΔΨm高低（除非結(jié)合圖像分析軟件測(cè)量強(qiáng)度）。

典型應(yīng)用：

? 活細(xì)胞實(shí)時(shí)成像（核心優(yōu)勢(shì)）： 共聚焦/雙光子顯微鏡下監(jiān)測(cè)單個(gè)細(xì)胞或細(xì)胞群ΔΨm的動(dòng)態(tài)變化過程（如藥物處理、代謝刺激、鈣信號(hào)等引起的快速或慢速波動(dòng)）。? 流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)ΔΨm（需結(jié)合CCCP對(duì)照進(jìn)行數(shù)據(jù)歸一化）。? 研究電興奮性細(xì)胞（如神經(jīng)元、心肌細(xì)胞）的線粒體功能，其對(duì)微環(huán)境變化敏感。? 需要長(zhǎng)時(shí)間觀察的實(shí)驗(yàn)。

二、線粒體質(zhì)量檢測(cè)

MitoTracker Green FM：線粒體特異性結(jié)構(gòu)標(biāo)記探針

MitoTracker Green FM（MTG） 是一種高性能熒光染料，專為精準(zhǔn)標(biāo)記細(xì)胞內(nèi)的總線粒體池而設(shè)計(jì)。其核心價(jià)值在于提供不依賴線粒體功能狀態(tài)的結(jié)構(gòu)性成像，成為研究線粒體質(zhì)量（Mass）的首選化學(xué)工具。

高選擇性與膜電位非依賴性

線粒體高度特異性：

? 通過優(yōu)化親脂性結(jié)構(gòu)，MTG選擇性蓄積于線粒體基質(zhì)，與胞內(nèi)其他細(xì)胞器（如溶酶體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)）無交叉染色，信噪比顯著優(yōu)于普通染料。? 標(biāo)記全部線粒體：
染色不依賴線粒體膜電位（ΔΨm），可同時(shí)標(biāo)記健康（高ΔΨm）與功能障礙（低ΔΨm/腫脹/碎片化）的線粒體，真實(shí)反映總線粒體的數(shù)量與形態(tài)分布。

卓越熒光特性

特性    科學(xué)優(yōu)勢(shì)    

明亮綠色熒光    激發(fā)/發(fā)射峰≈490/523 nm，兼容    

高光穩(wěn)定性    抗光漂白能力優(yōu)異，支持長(zhǎng)時(shí)間活細(xì)胞動(dòng)態(tài)成像（如線粒體融合/分裂追蹤）    

超低背景    僅在疏水性線粒體脂質(zhì)環(huán)境發(fā)光    

三、ROS檢測(cè)

DCFH-DA：廣譜ROS探針（以H?O?為主）

檢測(cè)原理

1. 穿透與活化：

? 脂溶性DCFH-DA被動(dòng)擴(kuò)散進(jìn)入細(xì)胞，被胞內(nèi)酯酶（Esterase）水解為極性分子 DCFH（2',7'-二氯二氫熒光素），無法穿出細(xì)胞膜。

2. 氧化與發(fā)光：

? DCFH被ROS（主要是H?O?，也可被?OH/ONOO?氧化） 氧化生成 DCF（2',7'-二氯熒光素）。? 發(fā)射綠色熒光（最大激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)：Ex ≈ 488 nm, Em ≈ 525 nm），強(qiáng)度與ROS水平正相關(guān)。

適用場(chǎng)景

? 細(xì)胞整體ROS水平初篩（如藥物/環(huán)境毒素誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激）。? 流式細(xì)胞術(shù)高通量檢測(cè)（如免疫細(xì)胞呼吸爆發(fā)）。? 與線粒體/溶酶體探針聯(lián)用（需避免光譜重疊）。

優(yōu)點(diǎn) vs 缺點(diǎn)

優(yōu)點(diǎn)    缺點(diǎn)    

操作簡(jiǎn)單，成本低廉    特異性低    

兼容常規(guī)流式/FITC濾光片    光漂白強(qiáng)    

可半定量比較不同處理組    自發(fā)氧化    

pH敏感性    熒光強(qiáng)度受胞內(nèi)pH影響    

MitoSOX? Red：線粒體超氧陰離子（O???）特異性探針

檢測(cè)原理

1. 靶向蓄積：

? 修飾的二氫乙錠（DHE）衍生物，帶親脂性三苯基膦陽離子（TPP?），通過線粒體膜電位（ΔΨm）定向富集到線粒體基質(zhì)。

2. 特異性氧化：

? 被線粒體內(nèi)的 超氧陰離子（O???） 氧化生成 2-羥基乙錠，與DNA結(jié)合后發(fā)射紅色熒光（最大激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)：Ex ≈ 510 nm, Em ≈ 580 nm）。

適用場(chǎng)景

? 線粒體特異性O(shè)???檢測(cè)（如凋亡、缺血再灌注損傷、神經(jīng)退行性疾病）。? 活細(xì)胞共聚焦動(dòng)態(tài)成像（觀察線粒體ROS時(shí)空變化）。? 評(píng)估線粒體靶向抗氧化劑效果（如MitoQ、SkQ1）。

優(yōu)點(diǎn) vs 缺點(diǎn)

優(yōu)點(diǎn)    缺點(diǎn)    

精準(zhǔn)定位線粒體    價(jià)格昂貴（約為DCFH-DA的10倍）    

對(duì)O???特異性高    （強(qiáng)于DHE）    

光穩(wěn)定性優(yōu)于DCFH-DA    部分細(xì)胞類型可能滯留胞質(zhì)（需優(yōu)化濃度）    

兼容TRITC/PE濾光片    高濃度可能抑制線粒體呼吸鏈    

四、文獻(xiàn)應(yīng)用實(shí)例

實(shí)例1：流式細(xì)胞術(shù)分析線粒體膜電位，質(zhì)量以及ROS水平

文章段落呈現(xiàn)

1.重懸與染色

將細(xì)胞沉淀重懸于 100 μl 1× 結(jié)合緩沖液（BD Bioscience 產(chǎn)品）中，加入以下熒光染料及抗體使得工作濃度達(dá)到相應(yīng)要求：

? 線粒體標(biāo)記：Mitotracker Green-FM（100 nM，綠色熒光，標(biāo)記線粒體）；? 活性氧（ROS）檢測(cè)：H?DCFDA（1 μM，進(jìn)入細(xì)胞后被 ROS 氧化發(fā)出綠色熒光）；? 線粒體膜電位（MMP）檢測(cè)：TMRE（100 nM，紅色熒光，依賴膜電位積聚于線粒體）；? 細(xì)胞表面標(biāo)志物抗體：? CD45-FITC（綠色熒光，標(biāo)記白細(xì)胞共同抗原）；? CD11b-PE（橙色熒光，標(biāo)記單核細(xì)胞 / 巨噬細(xì)胞 / 小膠質(zhì)細(xì)胞）；? GLAST-APC（紅色熒光，標(biāo)記星形膠質(zhì)細(xì)胞），均按 1:100 稀釋。? 孵育條件：避光孵育 15 分鐘，隨后加入 200 μl 1× PBS 稀釋。

2.流式細(xì)胞術(shù)分析

? 檢測(cè)參數(shù)：每樣本采集 10,000 個(gè)事件，通過流式細(xì)胞儀分析各熒光通道的信號(hào)強(qiáng)度，分別量化線粒體質(zhì)量（Mitotracker Green）、ROS 水平（H?DCFDA）、MMP（TMRE）及細(xì)胞分型（CD45/CD11b/GLAST）。

參考文獻(xiàn)[1]:Navarro E, Gonzalez-Lafuente L, Pérez-Liébana I, et al. Heme-Oxygenase I and PCG-1α Regulate Mitochondrial Biogenesis via Microglial Activation of Alpha7 Nicotinic Acetylcholine Receptors Using PNU282987. Antioxid Redox Signal. 2017;27(2):93-105. doi:10.1089/ars.2016.6698

實(shí)例2：流式細(xì)胞數(shù)分析線粒體膜電位（MMP）與線粒體質(zhì)量

文章段落呈現(xiàn)

1. 試劑與細(xì)胞準(zhǔn)備

? 細(xì)胞株：K562G、K562R 細(xì)胞。? 染色試劑：? JC-1 試劑（2 μM，貨號(hào) #HY-15534，品牌#MedChemExpress），用于檢測(cè)線粒體膜電位。? MitoTracker Green（0.1 μM，貨號(hào) #HY-135056，品牌#MedChemExpress），用于標(biāo)記線粒體質(zhì)量。

2. 染色操作流程

? 分組染色：? MMP 檢測(cè)：取細(xì)胞懸液，加入 JC-1 試劑（終濃度 2 μM），37℃避光孵育 30 分鐘。? 線粒體質(zhì)量檢測(cè)：另取細(xì)胞懸液，加入 MitoTracker Green（終濃度 0.1 μM），37℃避光孵育 30 分鐘。? 洗滌與重懸：孵育結(jié)束后，用 PBS 洗滌細(xì)胞 2 次，1000 rpm 離心 5 分鐘，棄上清，重懸于 500 μL PBS 中。

3. 流式細(xì)胞術(shù)分析

? 儀器參數(shù)：使用流式細(xì)胞儀（如 BD LSR II），設(shè)置 488 nm 激光激發(fā)：? JC-1 檢測(cè)：收集 530 nm（綠色，單體）和 590 nm（紅色，聚集體）熒光信號(hào)，計(jì)算紅綠熒光比值。? MitoTracker Green 檢測(cè)：收集 516 nm 綠色熒光信號(hào)，量化線粒體質(zhì)量。
參考文獻(xiàn)[2]：Feng L, Ding R, Qu X, et al. BCR-ABL triggers
a glucose-dependent survival program during leukemogenesis through the
suppression of TXNIP.Cell Death Dis. 2023;14(4):287. Published 2023 Apr 24. doi:10.1038/s41419-023-05811-2

實(shí)例3：流式細(xì)胞術(shù)分析線粒體活性氧（ROS）和膜電位

文章段落呈現(xiàn)

Figure 3A-B：線粒體 ROS 檢測(cè)（MitoSOX 染色）

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與目的

? 檢測(cè)指標(biāo)：線粒體超氧化物（ROS）水平，驗(yàn)證 ACLY 抑制劑誘導(dǎo)的氧化應(yīng)激。? 處理?xiàng)l件：35μM或70 μM ACLY 抑制劑處理 THP-1 細(xì)胞 3，6，9，12 小時(shí)。

試劑準(zhǔn)備：

? MitoSOX? Red（品牌：Thermo Fisher Scientific,貨號(hào)：M36008）用無血清培養(yǎng)基稀釋至 5 μM 終濃度。

細(xì)胞處理：

1. 收集處理 3，6，9，12 小時(shí)的細(xì)胞，1500 rpm 離心 5 分鐘，PBS 洗滌 1 次。2. 重懸于無血清培養(yǎng)基，加入 5 μM MitoSOX? Red，37℃避光孵育 10 分鐘。3. 預(yù)冷 PBS 洗滌 2 次，重懸于 1% FBS-PBS，立即上樣流式細(xì)胞儀。

檢測(cè)參數(shù)：

? 流式細(xì)胞儀：BD LSR II，488 nm 激光激發(fā)，PE檢測(cè)通道（580 nm 發(fā)射光檢測(cè)紅色熒光）。? 數(shù)據(jù)分析：FlowJo v10.9.0，計(jì)算高 ROS 細(xì)胞群（MitoSOX 高熒光）的比例。

3. 關(guān)鍵結(jié)果

? 70 μM ACLY 抑制劑處理后，高 ROS 細(xì)胞比例從 0 小時(shí)的約 10% 升至 12 小時(shí)的 40%，證實(shí) ROS 顯著積累。

Figure 3C-D：線粒體膜電位（MMP）檢測(cè)（TMRE 染色）

實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)與目的

? 檢測(cè)指標(biāo)：線粒體膜電位（ΔΨm），驗(yàn)證 ACLY 抑制劑誘導(dǎo)的 MMP 損傷。? 處理?xiàng)l件：70 μM ACLY 抑制劑處理 THP-1 細(xì)胞 6 小時(shí)。

試劑準(zhǔn)備：

? TMRE（品牌：MedChemExpress, 貨號(hào)：HY-D0985A）用無血清培養(yǎng)基稀釋至 100 nM 終濃度。

細(xì)胞處理：

1. 收集處理 6 小時(shí)的細(xì)胞，1500 rpm 離心 5 分鐘，PBS 洗滌 1 次。2. 重懸于無血清培養(yǎng)基，加入 100 nM TMRE，37℃避光孵育 15 分鐘。3. 預(yù)冷 PBS 洗滌 2 次，重懸于含 1% FBS-PBS，立即檢測(cè)。

檢測(cè)參數(shù)：

? 流式細(xì)胞儀：BD LSR II，488 nm 激光激發(fā)，PE檢測(cè)通道（575 nm發(fā)射光檢測(cè)紅色熒光）。? 數(shù)據(jù)分析：FlowJo v10.9.0，計(jì)算低 MMP 細(xì)胞群（TMRE 低熒光）的比例。

關(guān)鍵結(jié)果

? 70 μM ACLY 抑制劑處理 6 小時(shí)后，低 MMP 細(xì)胞比例從 0 小時(shí)的約 5% 升至 30%，表明 MMP 顯著降低。
參考文獻(xiàn)[3]:Watanabe A, Tipgomut C, Totani H, et al. Noncanonical TCA cycle fosters canonical TCA cycle and mitochondrial integrity in acute myeloid leukemia. Cancer Sci. 2025;116(1):152-163. doi:10.1111/cas.16347

實(shí)例4流式細(xì)胞術(shù)分析線粒體ROS，膜電位，質(zhì)量

文章段落呈現(xiàn)

 線粒體膜電位（ΔΨm）檢測(cè)

方法：

? 染料：使用 TMRE（Tetramethylrhodamine ethyl ester）（貨號(hào) HY-D0985A，品牌 MedChemExpress）。

步驟：

  1. 將細(xì)胞（2 × 10?）接種于12孔板，順鉑處理24小時(shí)。                                                                                                                                                                                        2. 加入100 nM TMRE染色液，避光孵育30分鐘。                                                                                                                                                                                                3. PBS洗滌2次。                                                                                                                                                                                                                                                4. 使用流式細(xì)胞儀（BD Accuri? C6）或共聚焦顯微鏡（Zeiss LSM800）檢測(cè)熒光強(qiáng)度。

結(jié)果展示：

線粒體ROS檢測(cè)

方法：

? 染料：MitoSOX? Red Mitochondrial Superoxide Indicator（貨號(hào) M36008，品牌 Thermo Fisher Scientific）。

步驟：

1. 順鉑處理細(xì)胞24小時(shí)。2. 收集細(xì)胞，用HBSS緩沖液洗滌。3. 加入5 μM MitoSOX染料，37°C避光孵育10分鐘。4. HBSS洗滌2次。5. 流式細(xì)胞儀（BD Accuri? C6）檢測(cè)紅色熒光（激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)：510/580 nm）。

結(jié)果展示

? ROS水平以相對(duì)熒光強(qiáng)度表示（*P < 0.05）。

線粒體質(zhì)量檢測(cè)

方法：

? 染料：MitoTracker Green FM（貨號(hào) M7514，品牌 Invitrogen)）。

步驟：

1. 細(xì)胞用PBS重懸。2. 加入100 nM MitoTracker Green，37°C避光孵育30分鐘。3. PBS洗滌2次。4. 流式細(xì)胞儀檢測(cè)綠色熒光（激發(fā)/發(fā)射波長(zhǎng)：490/516 nm）。

結(jié)果展示：

參考文獻(xiàn)[4]:Zheng ZY, Yang PL, Li RY, et al. STAT3β disrupted mitochondrial electron transport chain enhances chemosensitivity by inducing pyroptosis in esophageal squamous cell carcinoma. Cancer Lett. 2021;522:171-183. doi:10.1016/j.canlet.2021.09.035

主營(yíng)項(xiàng)目

1. 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

動(dòng)物飼養(yǎng)、疾病造模、行為學(xué)檢測(cè)、心功能、無創(chuàng)血壓、血常規(guī)、全自動(dòng)生化檢測(cè)等

2. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

CCK8/MTT、原代細(xì)胞分離、流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕、侵襲、遷移、EDU染色、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定株

3. 分子生物學(xué)

PCR檢測(cè)、熒光定量PCR、絕對(duì)定量PCR、端粒酶長(zhǎng)度、pull down、雙熒光素酶、SSR、SNP檢測(cè)等

4. 蛋白實(shí)驗(yàn)

WB、Co-IP、酵母雙雜

5. 病理實(shí)驗(yàn)

HE染色、免疫組學(xué)、電鏡

6. 生理生化實(shí)驗(yàn)

肝腎功能、抗氧化、免疫反應(yīng)等生理免疫指標(biāo);動(dòng)植物營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)、微量元素、重金屬、酶活等。

7. 多組學(xué)實(shí)驗(yàn)

基因組、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、蛋白組、代謝組、微生物多樣性、宏基因組、生信分析

8. 整體課題實(shí)驗(yàn)

方案設(shè)計(jì)、整體實(shí)驗(yàn)交付、標(biāo)書寫作、論文潤(rùn)色、協(xié)助投稿

聯(lián)系我們

康旭禾生物提供包括動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、分子實(shí)驗(yàn)、病理實(shí)驗(yàn)、流式檢測(cè)實(shí)驗(yàn)及論文翻譯、潤(rùn)色、投稿輔助等相關(guān)的各項(xiàng)服務(wù)。

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