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文獻解讀┃姜宏景教授團隊開展前瞻性研究：新輔助帕博利珠單抗聯(lián)合化療治療可切除食管鱗狀細胞癌的療效探索

論文信息：標題：A prospective study of neoadjuvant pembrolizumab plus chemotherapy for resectable esophagealsquamous cell carcinoma: The Keystone-001 trial期刊：Cancer Cell影響因子：48.8作者：Xiaobin Shang, Yongjie Xie, Jinpu Yu3, Jun Yu, yujun, Jihui Hao, Haojihui, Hongjing Jiang發(fā)表日期：2024年10月doi: 10.1016/j.ccell.2024.09.008關(guān)鍵詞：食管鱗狀細胞癌; 免疫檢查點抑制劑; 單細胞RNA測序; T細胞受體γ鏈恒定區(qū)2, 新輔助治療實驗設(shè)計總覽01研究隊列入組標…

科研干貨分享 | 常見的Cre小鼠和flox小鼠是什么意思？

在生物醫(yī)學(xué)研究中，Cre小鼠和flox小鼠是兩種非常重要的基因工程工具鼠，廣泛應(yīng)用于基因功能研究、疾病模型構(gòu)建等領(lǐng)域。它們通過Cre-loxP系統(tǒng)實現(xiàn)條件性基因操作，幫助科學(xué)家在特定組織或時間點精確調(diào)控基因表達。No.1Cre小鼠●定義：Cre小鼠是一種轉(zhuǎn)基因小鼠，其基因組中插入了Cre重組酶基因。Cre重組酶可以識別并切割特定的DNA序列——loxP位點。●作用：Cre重組酶能夠介導(dǎo)兩個loxP位點之間的DNA重組，從而刪除、倒位或插入特定的基因片段?！裉攸c： ? Cre表達可以由組織特異性啟…

國自然熱點剖析 | “腸道菌群”如何開展研究？

腸道菌群研究在2025年將繼續(xù)成為生物醫(yī)學(xué)研究的熱點，特別是在國自然項目中。以下是一些關(guān)鍵的研究方向和方法，以及如何開展腸道菌群研究的建議：No.1 核心菌群特征的研究腸道菌群研究在2025年將繼續(xù)成為生物醫(yī)學(xué)研究的熱點，特別是在國自然項目中。以下是一些關(guān)鍵的研究方向和方法，以及如何開展腸道菌群研究的建議：No.2腸道菌群與器官軸的深入研究腸道菌群通過多種渠道影響宿主的代謝和生理過程，包括通過腸菌影響腦、腎臟、肝臟和皮膚等器官。研究腸道菌群產(chǎn)生的小分子代謝物如何調(diào)…

"細胞-細胞間交互"三種常見作用方式和研究方法盤點，還不趕快收藏！

以外泌體（或者胞外囊泡）及其成分（如RNA、脂質(zhì)和蛋白）、線粒體轉(zhuǎn)移（比如隧道納米管介導(dǎo)的）、配體-受體（比如膜配體、分泌性配體以及膜受體）為代表的“細胞-細胞間通訊（Cell-Cell Communication，CCC）”是很多研究團隊關(guān)注的主題，也是這幾年國自然項目和高分文章經(jīng)常關(guān)注的領(lǐng)域。今天來盤點這三種作用方式的研究方法。 01外泌體介導(dǎo)的細胞間通訊外泌體是細胞分泌的納米級囊泡，攜帶蛋白質(zhì)、RNA等生物分子，通過與受體細胞融合或被內(nèi)吞，傳遞信號調(diào)節(jié)其功能。研 究 方 法（1）外…

WB條帶出現(xiàn)各種狀況? 原因分析和解決方法在這里！

Western Blot雖是實驗室最常用的蛋白分析技術(shù)，但是由于它步驟繁瑣、操作流程長、影響因素多，所以，導(dǎo)致我們在做實驗時會遇到各式各樣的問題。今天我們總結(jié)了一些WB實驗中經(jīng)常遇到的各種“奇葩”條帶問題，并為你推薦了常用的解決方法，希望對大家有所幫助。一、目標條帶沒有信號原因分析： 樣品中可能含有蛋白酶，使蛋白樣品分解成小分子。解決方法： 添加蛋白酶抑制劑。原因分析： 目標蛋白濃度過低（低于檢測下線）。力 解決方法：加大上樣量或提高目標蛋白濃度。 原因分析：…

動物實驗 | 裸鼠成瘤實驗反反復(fù)復(fù)？速看這個裸鼠成瘤小技巧，學(xué)會不再是難題！

裸鼠，也被稱為無胸腺裸鼠，是一種先天性胸腺缺陷的突變小鼠，其形成源于第VIII連鎖群內(nèi)裸體位點基因的純合。裸鼠在科學(xué)研究中展現(xiàn)出巨大的潛力，這主要歸功于其nu基因獨特的遺傳特性。經(jīng)過全球?qū)嶒瀯游镞z傳育種學(xué)家的不懈努力，nu基因已被成功導(dǎo)入不同近交系動物中，從而創(chuàng)建了一系列動物模型。僅小鼠模型一種，就已建立了二十余種近交系裸鼠。這些裸鼠具有不同的遺傳背景和nu基因的遺傳特性，為醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究者提供了一種極其寶貴的試驗材料。本文將重點探討裸鼠的成瘤實驗方法。?！?/p>

流式細胞術(shù) ：當(dāng)代最先進的細胞定量分析技術(shù)

流式細胞術(shù) (Flow Cytometry, FCM) 是一種在液流中快速檢測細胞特性的技術(shù)，是當(dāng)代最先進的細胞定量分析技術(shù)之一。它通過將單個細胞與特異性抗體結(jié)合，對細胞進行多參數(shù)定量分析，包括細胞表面標記、細胞內(nèi)蛋白質(zhì)表達、細胞周期、DNA含量等。流式細胞術(shù)具有高通量、高靈敏度、高特異性等優(yōu)點，廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)、血液學(xué)、腫瘤學(xué)等領(lǐng)域。01流式細胞術(shù)原理一、分析型流式細胞儀檢測原理將待測樣品制成單細胞懸液，在鞘液的包裹下進入流式細胞儀內(nèi)的檢測區(qū)域，細胞在激光的照射下會發(fā)生散…

qPCR原理雖懂，但數(shù)據(jù)難分析，你真的會設(shè)計qPCR實驗方案嗎？

一、qPCR 實驗前期籌備（一）RNA模板要求實驗啟動前，需確保RNA模板的純度、濃度及完整性均符合標準，方可推進后續(xù)步驟。具體要求如下：①RNA需保持一級結(jié)構(gòu)完好無損。②高純度：無DNA、游離核苷酸等核酸雜質(zhì)；無酶抑制性有機溶劑、金屬離子及蛋白質(zhì)、多糖、脂類等污染物。③足夠濃度：需滿足反轉(zhuǎn)錄實驗的基本需求。（二）qPCR引物設(shè)計規(guī)范引物建議長度介于18~30個堿基；GC含量應(yīng)控制在40%~60%之間；設(shè)計時應(yīng)跨越內(nèi)含子，避免內(nèi)部出現(xiàn)互補序列。通常，引物終濃度設(shè)為0.2μM效果較佳；若…

國自然實驗外包：有什么好處，選擇與注意事項

現(xiàn)如今，眾多科研人員已經(jīng)認同實驗外包這個行業(yè)，并融入其中，是國家鼓勵資源合理利用的很好方向。國自然實驗外包：有什么好處，選擇與注意事項。一般事先跟你講實驗風(fēng)險的，都是比較靠譜的公司，因為這些公司都曾經(jīng)遇到過很多問題，知道你的實驗?zāi)睦锟赡艹霈F(xiàn)問題。如果滿嘴跑火車，說實驗肯定可以做好，這樣的公司可能就是皮包公司，因為他不知道科研不是絕對的，不知道哪里可能出現(xiàn)問題。一定要與管實驗的技術(shù)聯(lián)系上，銷售員、業(yè)務(wù)代表等都是不做實驗的，實驗做得好不好，是否及時都…

實驗動物（小鼠與大鼠）的操作指南！

性別區(qū)分在實驗操作中，準確區(qū)分小鼠和大鼠的性別至關(guān)重要。主要依據(jù)以下特征進行判斷：1. 生殖器與肛門的距離：雄性小鼠和大鼠的生殖器與肛門距離較遠，而雌性則較近。這一特征在幼齡仔鼠中尤為明顯，因為此時它們的外生殖器尚未成熟。2. 毛發(fā)覆蓋情況：雄性小鼠和大鼠在生殖器與肛門之間通常有毛發(fā)生長，形成一條明顯的毛帶；而雌性則無毛，呈現(xiàn)一條清晰的縱溝。3. 乳頭的明顯程度：雌性小鼠和大鼠的乳頭相較于雄性更為突出和明顯。4. 生殖器官特征：雄性陰莖朝向頭部方向突出，可通…

細胞實驗干貨 | 常用的細胞活性檢測方法有哪些？

在細胞實驗研究中，驗證細胞活性是至關(guān)重要的環(huán)節(jié)，它關(guān)乎著細胞在特定條件下（例如藥物處理、放射性或紫外線照射、培養(yǎng)條件調(diào)整等）的生長狀態(tài)。細胞活性不僅是評估細胞健康的關(guān)鍵指標，也是眾多科研活動的基石。為此，活細胞分析技術(shù)日益凸顯其重要性。細胞活性的檢測方法眾多，其中包括臺盼藍染色法、熒光染色法、克隆（集落）形成法、ATP含量測定法以及比色法等。以下是對幾種常用方法的詳細介紹：No.1染色計數(shù)法01化學(xué)染色法 化學(xué)染色法中的染色計數(shù)法是細胞培養(yǎng)實驗中用于檢查細…

實驗動物知識 | 為什么6-8周的小鼠更受歡迎？

為何6-8周齡小鼠成為實驗首選？做過小鼠實驗的同學(xué)們或許都有這樣的疑惑......以下是小鼠出生后至14天的日形態(tài)變化概覽，可見小鼠驚人的生長速度，僅兩周（14天）便已初具形態(tài)。與人類相比，小鼠的壽命僅為約24個月，相當(dāng)于人類的全球平均壽命80歲。通過換算，我們得出小鼠生活1天約等于人類40天，即人類1年約等于小鼠9.125天（計算公式：(80歲×365天) ÷ (2年×365天)）。但需注意，小鼠與人類的成熟及衰老速率并不成線性比例，因此這種換算僅為大致對應(yīng)，具體年齡關(guān)系更為復(fù)雜（參考…

我?guī)熃阋荒?篇SCI，全靠這20個“寶藏網(wǎng)站”，太實用了

這20個寶藏網(wǎng)站，科研路上必備！精心篩選自100個科研資源，涵蓋SCI文獻檢索、高效閱讀、論文撰寫、科研繪圖等，讓你一旦接觸便難以割舍，科研之旅因此更加順暢。請耐心閱讀，尤其是末尾6款科研繪圖神器，絕對不容錯過。（閱讀完畢別忘了收藏點贊哦，避免未來迷失方向）一、文獻檢索篇01 PubMed鏈接：https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/由美國國立醫(yī)學(xué)圖書館NCBI打造，生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域權(quán)威檢索系統(tǒng)，收錄自1966年起，70余國4000余種期刊文獻，科研人必備。搭配Scholarscope、EasyPubMed等插…

細胞實驗 | 細胞瞬時轉(zhuǎn)染操作步驟及影響因素

細胞瞬時轉(zhuǎn)染是一種常用的實驗技術(shù)，用于將外源DNA或RNA導(dǎo)入細胞內(nèi)，從而研究基因的表達、功能和調(diào)控機制。以下是細胞瞬時轉(zhuǎn)染的一般步驟和注意事項。一、細胞瞬時轉(zhuǎn)染的一般步驟01細胞培養(yǎng) ? 提前一天鋪板，確保細胞均勻分布。轉(zhuǎn)染前將細胞培養(yǎng)至70-80%的密度，以保證細胞處于活躍的生長狀態(tài)。02轉(zhuǎn)染試劑和質(zhì)粒準備 ? 根據(jù)轉(zhuǎn)染試劑的說明書準備轉(zhuǎn)染試劑和質(zhì)粒DNA。轉(zhuǎn)染試劑的用量通常根據(jù)細胞類型和轉(zhuǎn)染效率來確定，一般為2-10μL/孔（對于24孔板）。質(zhì)粒DNA的用量通常為…

免疫熒光染色之抗體挑選全攻略

免疫熒光染色技術(shù)依賴于抗原抗體相互作用的極高特異性。通過將不影響抗原抗體功能的熒光染料標記在抗體或抗原上，當(dāng)標記的抗體與其對應(yīng)的抗原特異性結(jié)合時，可在熒光顯微鏡下觀測到一種特異的熒光信號，從而判定抗原的存在、散布和位置。今天，小編將與大家探討免疫熒光染色中抗體的選擇方法，希望能對大家有所幫助。免疫熒光染色一抗的挑選①依據(jù)樣本挑選一抗一抗的物種來源應(yīng)盡量避免與檢測樣本的物種相同，以防止二抗與樣本內(nèi)生的免疫球蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)。例如，若檢測的是小鼠樣本…

動物實驗?zāi)Ｐ?| 糖尿病動物模型方法大匯總

糖尿?。╠iabetes mellitus, DM）已對全球人類健康構(gòu)成重大威脅。DM及其并發(fā)癥不僅顯著降低患者生活質(zhì)量，還是導(dǎo)致殘疾和死亡的關(guān)鍵因素。因此，構(gòu)建恰當(dāng)?shù)奶悄虿游锬Ｐ停陨钊胩骄緿M及其并發(fā)癥的發(fā)病機理，顯得至關(guān)重要。當(dāng)前，制備DM動物模型的主要方法包括：胰腺切除術(shù)、化學(xué)藥物誘導(dǎo)、利用自發(fā)性糖尿病動物及轉(zhuǎn)基因技術(shù)等。一、胰腺切除法制備DM模型常選用狗、貓及大鼠等動物，通過全部或近乎全部切除其胰腺（同時保留胰十二指腸動脈吻合弓）。若實驗動物連續(xù)兩日血糖濃度超過1…

技術(shù)貼 |畢業(yè)論文寫作的方法與技巧

快畢業(yè)啦?。。〈蠹艺撐亩紝懥藛?？科研論文是反映科研成果和科研能力的一類學(xué)術(shù)性文章。從研究背景對象，到提出問題、研究方法、得出的結(jié)論，以及作者綜合實驗數(shù)據(jù)和其他資料分析得出的新的見解。No.1寫作步驟01 前期準備 （1）收集和篩選相關(guān)資料。要對閱讀的文獻進行區(qū)分，分為需要精讀和泛讀的文章。與自己研究主題密切相關(guān)的文獻應(yīng)當(dāng)反復(fù)仔細閱讀；與研究主題關(guān)聯(lián)程度小的文章則彩英瀏覽和區(qū)別閱讀的方法。還需注意年代，一般先了解3~5年內(nèi)的文獻。（2）充分了解相關(guān)研究背景后，根…

當(dāng)審稿人要求補充實驗，我們應(yīng)該怎么辦？

在SCI論文的評審流程中，審稿人提議增添實驗數(shù)據(jù)是屢見不鮮的環(huán)節(jié)。面對這一情形，作者往往面臨兩種策略：實施額外實驗或維持原狀。這兩種路徑各有其利弊，需依據(jù)實驗的可行性、研究的核心目標及論文的整體布局來謹慎抉擇。01選擇實施額外實驗當(dāng)審稿人建議增加實驗時，其初衷往往在于通過更詳盡的數(shù)據(jù)支撐或?qū)嶒烌炞C來提升研究的精確度和說服力。若你傾向于采納此建議，需考量以下幾個維度： ? 實驗結(jié)果的預(yù)期價值：額外實驗的結(jié)果充滿未知，但理想狀況下，它能強化原有研究結(jié)論，為…

穩(wěn)定細胞株篩選---抗生素如何選？

在生物醫(yī)藥領(lǐng)域，基因轉(zhuǎn)染是一種常見的實驗技術(shù)，用于將外源基因?qū)爰毎?。然而，要想成功地進行穩(wěn)定轉(zhuǎn)染并篩選出陽性細胞株，選擇合適的篩選抗生素至關(guān)重要。本文將詳細介紹如何選擇穩(wěn)定轉(zhuǎn)染的篩選抗生素。通常構(gòu)建的載體上有兩個抗性基因，如，氨芐青霉素（Amp）和、新霉素抗性基因(neo)。那么建立穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞系時該用哪種抗生素來篩細胞呢？很多真核表達質(zhì)粒上都有兩個抗性基因，但一般其中只有一個抗性可以用來篩細胞。其中氨芐青霉素對細胞是沒有篩選作用的，這是用于構(gòu)建克隆時篩…

【科研干貨】各類體外細胞實驗合集詳解！

體外細胞實驗是我們開展課題研究及進行生物醫(yī)藥醫(yī)學(xué)研究非常重要的途徑。今天整理了多種體外細胞實驗的干貨共大家學(xué)習(xí)和參考：MPC5足細胞缺氧模型、脊索樣細胞誘導(dǎo)分化成髓核樣細胞、人誘導(dǎo)多功能干細胞(hiPSC)誘導(dǎo)分化成脊索樣細胞、大鼠脂肪間充質(zhì)干細胞成脂誘導(dǎo)模型、3T3-L1細胞成脂誘導(dǎo)模型、乳鼠二型肺泡上皮細胞(AECII)分離提取。LPS誘導(dǎo)細胞炎癥模型1. 實驗背景脂多糖(Lipopolysaccharide)(英文簡寫LPS)是革蘭氏陰性細菌細胞壁外壁的組成成分，是由脂質(zhì)和多糖構(gòu)成的物質(zhì)(糖脂質(zhì)…