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細胞實驗 ▏細胞凋亡之Hoechst染色實驗

細胞凋亡之Hoechst染色實驗 細胞凋亡是指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細胞自主的有序的死亡。細胞凋亡與細胞壞死不同，細胞凋亡不是一件被動的過程，而是主動過程，它涉及一系列基因的激活、表達以及調(diào)控等的作用，它并不是病理條件下，自體損傷的一種現(xiàn)象，而是為更好地適應生存環(huán)境而主動爭取的一種死亡過程。實驗原理Hoechst 33258和Hoechst 33342均為非嵌入性熒光染料，它們在活細胞中DNA聚AT序列富集區(qū)域的小溝處與DNA結(jié)合?；罴毎蚬潭毎蓮牡蜐舛热芤褐袛z取該染…

動物實驗 ▏小鼠骨髓間充質(zhì)干細胞成骨誘導分化

髓間充質(zhì)干細胞是干細胞家族的重要成員，來源于發(fā)育早期的中胚層和外胚層，屬于多能干細胞，間充質(zhì)干細胞最初是在骨髓中被發(fā)現(xiàn)，因其具有多向分化潛能、來源廣泛，獲取簡單，易于分離培養(yǎng)，體外增殖力強等特點而日益受到人們的關(guān)注。目前發(fā)現(xiàn)其具有能夠分化形成至7種組織細胞，如成骨細胞、成脂細胞等組織細胞的潛能?？梢詾楣?、肌肉等結(jié)締組織的損傷修復提供潛在的細胞來源，被認為是骨組織工程中最佳的種子細胞。實驗原理 間充質(zhì)干細胞（MSC）是干細胞的一種,具有向多種類型細胞分化…

細胞增殖檢測——EdU檢測法

細胞增殖是生物體的重要生命特征，指細胞在周期調(diào)控因子的作用下，通過DNA復制等反應，完成細胞分裂的過程。增殖檢測一般是分析分裂中細胞的數(shù)量變化，進而反映細胞的生長狀態(tài)及活性，目前廣泛應用于腫瘤生物學，分子生物學，藥代動力學等領域。細胞增殖檢測的方法眾多，應用非常廣泛，按檢測原理主要分為4 類：檢測DNA合成、檢測代謝活性、檢測細胞增殖相關(guān)抗原和檢測ATP濃度。其中，細胞DNA合成檢測是通過測定細胞的DNA合成量來評價細胞的增殖能力，直接測定DNA合成是檢測細胞增殖最…

Western Blot—實驗步驟及結(jié)果分析

原理 蛋白質(zhì)印跡法 (WB) 是一種廣泛使用的基于抗體的技術(shù)，借助抗體與目的蛋白（抗原）的特異性結(jié)合，檢測細胞或組織提取物中的蛋白質(zhì)表達水平。 實驗流程圖小編將詳細介紹蛋白免疫印跡實驗的步驟，并提供結(jié)果分析的指導，助大家更好的完成實驗。實驗步驟01樣品制備蛋白免疫印跡實驗的第一步是樣品制備。通常，您可以從細胞培養(yǎng)物、動物組織或微生物培養(yǎng)物等樣品中收集蛋白質(zhì)。在此過程中，您需要避免蛋白質(zhì)的降解和失活。以下是一般的樣品制備步驟：a. 收集細胞或組織：使用適當?shù)木彌_…

速看！ELISA實驗遇到的常見問題及解決方法

ELISA實驗對科研人員而言，如不注意實驗操作過程中的各個環(huán)節(jié)，可能會出現(xiàn)白板，顯色弱靈敏度低，花板無梯度背景高等現(xiàn)象，從而阻礙我們實驗的快速推進。下面小編整理出ELISA實驗操作時常會遇到的問題，大家快來圍觀吧。1ELISA實驗結(jié)果空白背景高2假陽性多，本底高甚至花板。3ELISA實驗結(jié)果無信號4ELISA實驗結(jié)果整板讀數(shù)偏低5ELISA實驗結(jié)果標準曲線不佳/重復性差6ELISA實驗結(jié)果整板呈規(guī)則黃色如有需要，請聯(lián)系我們~主營項目1. 動物實驗動物飼養(yǎng)、疾病造模、行為學檢測、心功能、無創(chuàng)血…

實驗動物小鼠——C57家族簡介

C57小鼠的由來C57BL作為小鼠品系中廣泛應用的代表，其名稱中的BL源自英文Black，意指該品系小鼠以黑色外觀顯著區(qū)別于其他品系。C57BL涵蓋多個科研常用的亞系，如C57L、C57BL/6、C57BL/10，其中C57BL/6尤為普遍，這些小鼠常被簡稱為黑鼠或黑色小鼠。但需注意的是，此類稱呼易引起混淆：提及實驗用黑小鼠時，雖常指C57BL/6，卻非絕對。另外，C57BL/6亞系內(nèi)還包含多種基因型小鼠，其命名習慣是在6后附加字母，例如C57BL/6J、C57BL/6N，因此僅憑黑色外觀無法確定其具體基因型。值得注意的是…

重磅！國自然函評已經(jīng)開始！

最近，有網(wǎng)友稱2025 年國家自然科學基金函評已經(jīng)開始，并提到今年的基金委方面有兩大動態(tài)，一是評審將涉及 2/3 小同行，二是評審人員歲數(shù)超過 45 歲。目前尚不清楚發(fā)布此次信息的具體來源，不過可以確定的是，大家等待國自然項目結(jié)果的心，已經(jīng)按捺不住了。根據(jù)國家自然科學基金委員會發(fā)布的《關(guān)于 2025 年度國家自然科學基金項目申請與結(jié)題等有關(guān)事項的通告》，自然科學基金委將于 2025 年 4 月 29 日前公布申請項目初審結(jié)果，并受理復審申請。并且按照以往，函評一般是在初審結(jié)果公布…

醫(yī)學碩博論文撰寫技巧大揭秘：掌握這些要點，畢業(yè)之路暢通無阻！

醫(yī)學博士論文作為學術(shù)生涯的關(guān)鍵節(jié)點，不僅是研究者學術(shù)成果的集中體現(xiàn)，更是其創(chuàng)新能力的有力見證。論文撰寫涉及多個復雜環(huán)節(jié)，任何一處的疏忽都可能導致研究方向的偏離或?qū)W術(shù)價值的折損。本文整合網(wǎng)絡精華資源與豐富實踐經(jīng)驗，將從文獻收集起步，逐步深入到論文各部分的撰寫要點，直至最終完稿，全方位為你剖析醫(yī)學博士論文撰寫的核心要素，助力你跨越畢業(yè)障礙，邁向?qū)W術(shù)新高度。PART 01文獻收集與選題01文獻收集策略入學伊始，一旦確定研究領域，文獻收集與研讀便成為首要且持續(xù)的任…

根據(jù)孔數(shù)、形狀、處理方式、顏色選擇細胞培養(yǎng)板的方法

細胞培養(yǎng)是一種基本的生命科學研究技術(shù)，已成為現(xiàn)代生物醫(yī)學研究的重要手段。細胞培養(yǎng)板是細胞培養(yǎng)實驗中常用和重要的實驗室耗材，選擇合適的細胞培養(yǎng)板對細胞的生長和實驗結(jié)果的準確性有至關(guān)重要的影響。細胞培養(yǎng)板根據(jù)底部形狀的不同可分為平底、圓底（U型）和V底（V型）；培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384、1536孔等；表面處理方式有TC處理和超低吸附處理；顏色有透明色、白色、黑色等。那么如何從這么多的規(guī)格中選擇適合實驗的細胞培養(yǎng)板呢？1孔數(shù)的選擇細胞培養(yǎng)板的孔數(shù)包含…

動物實驗指南——大鼠ll型糖尿?。═2DM）模型構(gòu)建

實驗背景 糖尿病(diabetes mellitus，DM)是一類嚴重威脅人類身體健康的代謝性疾病。由于胰島素分泌缺陷或作用障礙引起機體慢性血糖水平增高，導致糖類、蛋白質(zhì)、脂肪等的代謝紊亂，繼而引起腎臟、心臟等組織器官慢性損害。通過構(gòu)建II型糖尿病(T2DM)動物模型，對研究T2DM的發(fā)生機理和臨床防治十分重要。常見模型構(gòu)建方法01高脂飼料誘導模型通過喂養(yǎng)大鼠或小鼠高脂肪飲食，誘導胰島素抵抗和糖耐量異常，最終發(fā)展為Ⅱ型糖尿病02單一基因缺陷模型通過基因工程手段，敲除或過表達與糖代謝…

深扒細胞凋亡：8種細胞凋亡檢測法的原理、優(yōu)缺點

細胞凋亡（apoptosis）是指細胞在一定的生理或病理條件下，受內(nèi)在遺傳機制控制，按照自身程序主動性、生理性的死亡過程。細胞凋亡是細胞的一種基本生物學現(xiàn)象，在多細胞生物去除不需要的或異常的細胞中起著必要的作用。它在生物體的進化、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定以及多個系統(tǒng)的發(fā)育中起著重要的作用。細胞凋亡不僅是一種特殊的細胞死亡類型，而且具有重要的生物學意義及復雜的分子生物學機制。No.1Annexin V-FITC/PI雙染色法原理：利用Annexin V結(jié)合凋亡細胞外翻的磷脂酰絲氨酸（PS），F(xiàn)ITC標記顯…

康旭禾生物，一站式科研實驗外包解決方案

在流體力學科研進程中，實驗環(huán)節(jié)不僅繁重耗時，更是推動研究進展的核心要素。面對種種棘手難題，科研人員往往倍感壓力：? 想做實驗，卻沒有現(xiàn)成設備平臺？? 有平臺，卻不清楚如何設計方案？? 實驗做完了，但數(shù)據(jù)不穩(wěn)定，無法用于論文？? 實驗進度一拖再拖，申報節(jié)奏全被打亂？我們深切洞察這些困境給科研人員帶來的困擾與挑戰(zhàn)。為此，我們精心組建了一支由行業(yè)資深專家構(gòu)成的專業(yè)團隊，致力于為高校及科研工作者量身定制流體力學實驗整體解決方案，并提供全方位的外包服務。讓您得…

科研干貨！CCK8實驗大總結(jié)：應用領域、實驗原理、實驗流程及操作要點

ell Counting Kit-8（簡稱CCK8）是一種基于WST-8的廣泛應用于細胞增殖和細胞毒性的檢測試劑。WST-8【化學名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽】，是一種類似于MTT的化合物，它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）存在的情況下，被線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的橙黃色甲瓚產(chǎn)物（formazan）。細胞增殖越多越快，顏色越深；細胞毒性越大，則顏色越淺，對于同樣的細胞，顏色的深淺與活細胞的數(shù)量成正比，因此可…

2025年度省自然科學基金項目申請常見問答

主營項目1. 動物實驗動物飼養(yǎng)、疾病造模、行為學檢測、心功能、無創(chuàng)血壓、血常規(guī)、全自動生化檢測等2. 細胞實驗CCK8/MTT、原代細胞分離、流式細胞實驗、細胞劃痕、侵襲、遷移、EDU染色、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定株3. 分子生物學PCR檢測、熒光定量PCR、絕對定量PCR、端粒酶長度、pull down、雙熒光素酶、SSR、SNP檢測等4. 蛋白實驗WB、Co-IP、酵母雙雜5. 病理實驗HE染色、免疫組學、電鏡6. 生理生化實驗肝腎功能、抗氧化、免疫反應等生理免疫指標;動植物營養(yǎng)指標、微量元素、重金屬、酶活等。7. 多組…

【動物實驗】不同血友病模型對比及案例分析！

模型差異總結(jié)模型優(yōu)缺點與應用場景模型構(gòu)建案例1. 實驗方法① 基因敲除（Knockout）技術(shù)：CRISPR/Cas9或同源重組靶向刪除特定外顯子（如F8 exon 16/17）。應用：小鼠血友病A/B型。② 轉(zhuǎn)基因（Transgenic）技術(shù)：顯微注射人類突變基因（如R539C、HLAD28/1*1501）至胚胎干細胞或受精卵。應用：模擬人類錯義突變。③ 敲入（Knock-in）技術(shù)：靶向插入特定突變（如R33Q、G581E）至內(nèi)源基因位點，保留表達框架。應用：研究CRM+/-表型。④ 自然突變模型技術(shù)：篩選自然發(fā)生的突變個體（如犬外顯…

單細胞必學！一文帶你讀懂單細胞轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析

單細胞轉(zhuǎn)錄組測序近幾年相當熱門，這個技術(shù)能讓我們獲取每個測得細胞的轉(zhuǎn)錄組信息，但問題是單細胞測序相當大的數(shù)據(jù)量給后續(xù)的數(shù)據(jù)分析帶來了不少挑戰(zhàn)。單細胞轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析的難點主要在于細胞的質(zhì)量不確定，細胞的數(shù)量大，從單細胞測序技術(shù)誕生至今，測到的細胞通量越來越高，現(xiàn)在一次單細胞轉(zhuǎn)錄組測到的細胞數(shù)可達100K~200K[1]。因而，對分析人員的要求也越來越高。雖然單細胞轉(zhuǎn)錄組的分析不容易，但依然是有清晰的流程噠（見下圖）:接下來我們一起看看，每一步都需要做些啥。01測序…

細胞轉(zhuǎn)染與實驗常見問題解決方法

在進行基因的功能研究時，主要策略有兩個，一個是過表達，一個是做敲除或做干擾。在此過程中，細胞轉(zhuǎn)染是很常規(guī)的操作，但是有時會遇到轉(zhuǎn)染效率低，導致實驗無法推進。今天我們分享下細胞轉(zhuǎn)染過程的幾個注意事項。1. 關(guān)于啟動子的選擇。 啟動子對于細胞轉(zhuǎn)染效率有很大的影響。通常情況下，過表達質(zhì)粒選擇廣譜強啟動子CMV，干擾質(zhì)粒選擇U6或H1作為啟動子（見下圖）。在特殊情況下，對于特異性細胞的轉(zhuǎn)染或感染，需要考慮用特異啟動子，比如心肌細胞特異啟動子cTNT，肝臟特異啟動子TBG，…

動物實驗 ▏常見小鼠腫瘤轉(zhuǎn)移模型，看這篇就夠了

腫瘤是當前世界上危害人類生命健康的重要疾病之一。但超過90%的癌癥患者的相關(guān)死亡是由腫瘤轉(zhuǎn)移引起的，而非原發(fā)腫瘤，且轉(zhuǎn)移性癌癥患者的5年生存率明顯低于局限性癌癥患。因此，腫瘤轉(zhuǎn)移無疑成為了腫瘤課題研究的重要方向。建立合適的腫瘤轉(zhuǎn)移動物模型對模擬臨床中人體腫瘤轉(zhuǎn)移過程和研究癌癥的發(fā)病機制都有重要意義。01腫瘤轉(zhuǎn)移過程腫瘤轉(zhuǎn)移是一個動態(tài)的、多方面的過程，在此過程中，正常細胞轉(zhuǎn)變?yōu)橹掳┘毎?，這些細胞不受控制地增殖，逃避免疫系統(tǒng)，對程序性細胞死亡產(chǎn)生抗性，刺激…

【關(guān)注】全民“體重管理”，2026年國自然Top級熱點“脂代謝”方向熱門思路看過來！

乘著全國兩會的東風，“體重管理”一夜之間成為時下熱議的健康話題。國家扶持，申基不愁！小編大膽推測，脂代謝這個熱點方向?qū)⒊蔀槊髂陣匀坏囊淮鬅衢T。脂代謝研究可以如何開展呢？以下幾個方面大家可以考慮哦：1、脂質(zhì)合成與降解的分子機制研究關(guān)鍵酶和信號通路在脂質(zhì)合成中的作用，例如二酰甘油?；D(zhuǎn)移酶（DGAT）在甘油三酯合成中的角色。2、脂代謝與疾病的關(guān)系探討脂代謝異常與疾病如肥胖、糖尿病、心血管疾病等之間的關(guān)系。3、細胞信號傳導與脂代謝探索細胞內(nèi)外信號分子如何調(diào)控…

【文獻讀圖】一文讀懂生存曲線！

作為一名要經(jīng)常接觸動物試驗的生物醫(yī)學科研人，不免會遇到需要通過動物試驗來探究某種治療方法效果的時候。此時，就需要通過繪制【生存曲線】來更直觀地表達和評估不同方法的療效對比。今天這期，就快快跟著小編來一起學習怎么看懂【生存曲線】圖中各項數(shù)值的意義吧~導讀1.生存曲線的定義&用途2.生存曲線怎么看（案例解讀）3.生存曲線相關(guān)疑問&解答01生存曲線的定義&用途定義生存曲線用于描述研究群體的生存時間，能夠讓研究者直觀地了解患者在一定時間內(nèi)的生存概率，評估…