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一、動物實(shí)驗(yàn)基本方法指南

1、動物實(shí)驗(yàn)給藥劑量計算方法

2、動物實(shí)驗(yàn)常用給藥方式

1、皮下注射。捏起皮膚，刺入針頭，固定后即可注射

2、皮內(nèi)注射。剪掉注射部位動物毛發(fā)，消毒，用皮試針頭緊貼皮膚表層刺入皮內(nèi)，針頭上挑再稍刺入

3、肌肉注射。適合不溶于水而混懸狀態(tài)的藥物。選擇肌肉發(fā)達(dá)、無大血管經(jīng)過的部位，如臀部

4、腹腔注射。腹部消毒，在左或右側(cè)腹部將針頭刺入皮下，沿皮下向前推進(jìn)0.5CM，針頭與皮膚45度角方向穿過腹肌刺入腹腔，此時應(yīng)有落空感，回抽無腸液、尿液后，緩緩?fù)迫胨幰骸６嘤么笫笮∈?/p>

5、靜脈注射。尾靜脈注射(大鼠小鼠)，前肢皮下靜脈注射(豚鼠)，耳緣靜脈注射(兔)

6、淋巴囊注射。蛙類常采用此法，多選腹部淋巴囊，從大腿上端刺入，進(jìn)入腹壁肌層，再進(jìn)入腹壁皮下

7、灌胃法。灌胃針深度:3-4cm(小鼠)，4-6cm(大鼠/豚鼠),灌胃量:0.2-1ML小鼠，1-4ml大鼠。

3、動物實(shí)驗(yàn)藥品劑型的配置

 在動物實(shí)驗(yàn)中藥物應(yīng)該優(yōu)先選擇純粉(原料藥)，可以排除輔料的干擾劑量設(shè)計更加靈活。需要使用溶劑、助溶劑將藥物配制成一定的劑型后給動物使用。優(yōu)先選擇無毒性、與藥物無反應(yīng)的溶劑。

1、水溶性藥物配制。選用溶劑為純水、或者生理鹽水等水系溶劑，注射前建議微膜過濾除菌

2、水不溶或者難溶藥物(脂溶性)配制?？梢試L試使用植物油類，如大豆油、蓖麻油，橄欖油作為溶劑，或者添加助溶劑，如2%吐溫-80，PEG400，丙二醇,泊洛沙姆,0.5%CMC-NA,10%Solutolβ-環(huán)狀糊精,羥丙基β-環(huán)狀糊精,甘油。如確實(shí)需要使用DMSO，請確保DMSO終濃度<5%。不建議使用乙醇、甲醇等有機(jī)溶劑。灌胃，混懸狀態(tài)也可。

二、動物麻醉劑

1、水合氯醛;Chloral hydrate

純度:>99%

溶解性:water>10mg/ml

常用濃度:5-10%,給藥劑量300mg/kg(動物體重);給藥方式腹腔注射:因具體動物情況不同，需要根據(jù)自己實(shí)驗(yàn)條件進(jìn)行模式,信息僅供參考。

特點(diǎn):麻醉較淺，麻醉持續(xù)時間較長，對鼠、兔肌肉松弛效果一般，可與烏拉坦合用，增強(qiáng)效果。

2、烏拉坦:烏來糖;尿烷 Ethy carbamate

純度:>99%溶解性:溶于水特點(diǎn):麻醉持續(xù)時間2小時左右，多用于鼠和兔的麻醉，腹腔注射，或者耳緣靜脈(免)。常用劑量為1000mg/KG(體重)，使用濃度20%，肌肉松弛效果較好，作用溫和，可用于深度麻醉。

3、乙酰丙嗪 Acepromazine maleate

純度:>98%溶解性:水>10mg/MI特點(diǎn):常用于大型動物如犬和貓的輔助麻醉，肌肉注射，給藥劑量0.1mg/kg(體重)

4、a-氯醛糖 a-Chloralose

總含量>98%溶于乙醇，微溶于水特點(diǎn):a-氯醛糖在動物實(shí)驗(yàn)中可用做麻醉劑，常用劑量50-80mg/kg,麻醉時間可達(dá)5-6小時。麻醉時間持續(xù)時間長，對心血管和呼吸系統(tǒng)抑制輕，但是麻醉淺，鎮(zhèn)痛效果不佳，常伴有不自主興奮

5、鹽酸氯丙嗪，Chlorpromazine HCl

純度:>98%溶解性:水>50mg/ml特點(diǎn):可輔助增強(qiáng)麻醉效果，起鎮(zhèn)定作用，腹腔注射，劑量3-5mg/kg(體重)

6、三溴乙醇(阿佛丁),2,2,2-Tribromoethanol

配制:將本產(chǎn)品和叔戊醇，混合以制備原液，三溴乙醇體積占66.7%，得到三溴乙醇濃度為1g/mL的母液:該母液應(yīng)避光保存在冰箱中。施行麻醉前配置新鮮工作液，用后處理掉。文獻(xiàn)中描述的大多數(shù)溶解在叔戊醇中的三溴乙醇含有無菌生理鹽水。該工作液必須加熱至溶解，加熱時注意溫度不要超過40度。

注射前配制:滅菌的磷酸鹽緩沖液參考劑量(小鼠):200mg/kg給藥處理:腹膜腔內(nèi)注射

三、動物模型類型

1、心血管疾病動物模型

1、動脈粥樣硬化(Atherosclerosis)動物模型

病理指標(biāo):血管內(nèi)皮細(xì)胞活化，單核細(xì)胞黏附遷移至內(nèi)膜下，巨噬細(xì)胞吞噬氧化修飾的脂蛋白轉(zhuǎn)化為泡沫細(xì)胞、內(nèi)膜中膜增生，最終形成粥樣斑塊或引起血管堵塞。

2、高脂肪血動物模型(hyperlipidemia)

病理指標(biāo):血液中總膽固醇或/和甘油三酯過高

3、高血壓動物模型(Hypertension)

病理指標(biāo) :大鼠采用尾容積法測定清醒狀態(tài)下大鼠的間接血壓(收縮壓)。血壓在85~115mmHg范圍為正常血壓大鼠;各種造型處理后凡血壓比處理前高20mmHg以上且高于115mmHg

2、消化系統(tǒng)疾病模型

常見的消化系統(tǒng)疾病模型種類有，慢性萎縮性胃炎，胃潰瘍，十二指腸潰瘍，胃癌，胰腺炎，結(jié)腸炎等

3、糖尿病動物模型

糖尿病diabetes;DM疾病簡介:糖尿病是一組以高血糖為特征的代謝性疾病。高血糖則是由于胰島素分泌缺陷或其生物作用受損，或兩者兼有引起。疾病常見分型如下:

|型糖尿病(胰島素依賴型)diabetes mellitustype1(insulin-dependent diabetes melitus;IDDM)1型糖尿病患者需依賴注射胰島素存活。

2型糖尿病(非胰島素依賴型)diabetes mellitus,type2(Noninsulin-dependent diabetes mellitusNIDDM)這一類型的糖尿病患者占總數(shù)的80%~90%。2型糖尿病原名叫成人發(fā)病型糖尿病

四、癌癥誘導(dǎo)劑

利用化學(xué)因素引起細(xì)胞遺傳性特異異常，可以制備動物腫瘤模型。

主營項(xiàng)目

1. 動物實(shí)驗(yàn)

動物飼養(yǎng)、疾病造模、行為學(xué)檢測、心功能、無創(chuàng)血壓、血常規(guī)、全自動生化檢測等

2. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

CCK8/MTT、原代細(xì)胞分離、流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕、侵襲、遷移、EDU染色、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定株

3. 分子生物學(xué)

PCR檢測、熒光定量PCR、絕對定量PCR、端粒酶長度、pull down、雙熒光素酶、SSR、SNP檢測等

4. 蛋白實(shí)驗(yàn)

WB、Co-IP、酵母雙雜

5. 病理實(shí)驗(yàn)

HE染色、免疫組學(xué)、電鏡

6. 生理生化實(shí)驗(yàn)

肝腎功能、抗氧化、免疫反應(yīng)等生理免疫指標(biāo);動植物營養(yǎng)指標(biāo)、微量元素、重金屬、酶活等。

7. 多組學(xué)實(shí)驗(yàn)

基因組、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、蛋白組、代謝組、微生物多樣性、宏基因組、生信分析

8. 整體課題實(shí)驗(yàn)

方案設(shè)計、整體實(shí)驗(yàn)交付、標(biāo)書寫作、論文潤色、協(xié)助投稿

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