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動(dòng)物實(shí)驗(yàn)指南——大鼠ll型糖尿?。═2DM)模型構(gòu)建

瀏覽:263 發(fā)表時(shí)間:2025-08-06

實(shí)驗(yàn)背景

   

糖尿病(diabetes mellitus,DM)是一類(lèi)嚴(yán)重威脅人類(lèi)身體健康的代謝性疾病。由于胰島素分泌缺陷或作用障礙引起機(jī)體慢性血糖水平增高,導(dǎo)致糖類(lèi)、蛋白質(zhì)、脂肪等的代謝紊亂,繼而引起腎臟、心臟等組織器官慢性損害。通過(guò)構(gòu)建II型糖尿病(T2DM)動(dòng)物模型,對(duì)研究T2DM的發(fā)生機(jī)理和臨床防治十分重要。


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常見(jiàn)模型構(gòu)建方法




01

高脂飼料誘導(dǎo)模型

通過(guò)喂養(yǎng)大鼠或小鼠高脂肪飲食,誘導(dǎo)胰島素抵抗和糖耐量異常,最終發(fā)展為Ⅱ型糖尿病


02

單一基因缺陷模型
通過(guò)基因工程手段,敲除或過(guò)表達(dá)與糖代謝相關(guān)的特定基因,如胰島素受體(IR)、葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(GLUT)等


03

化學(xué)誘導(dǎo)模型
使用化學(xué)物質(zhì)如鏈脲佐菌素(STZ)單獨(dú)或與其他化合物聯(lián)合使用,破壞胰島β細(xì)胞,導(dǎo)致胰島素分泌不足


04

復(fù)合誘導(dǎo)模型

結(jié)合高脂飲食和化學(xué)誘導(dǎo)劑(如STZ),模擬人類(lèi)Ⅱ型糖尿病的病理生理特征



高脂飼料誘導(dǎo)模型造模



本實(shí)驗(yàn)旨在通過(guò)高脂飼料誘導(dǎo)建立Ⅱ型糖尿?。═2DM)動(dòng)物模型,以模擬人類(lèi)T2DM的病理生理特征,為藥物研發(fā)和治療策略提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)


01

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選擇


SD大鼠,周齡6-8周,體重180-220g,健康雄性


02

實(shí)驗(yàn)設(shè)備與儀器


STZ溶液、注射器、飼養(yǎng)籠、飲水瓶、飼料槽、體重秤、血糖儀等


03

實(shí)驗(yàn)方法


1.動(dòng)物適應(yīng)性飼養(yǎng)

將大鼠在SPF級(jí)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)室中適應(yīng)性飼養(yǎng)7天,確保其適應(yīng)新環(huán)境并排除潛在疾病


2. 高脂飼料喂養(yǎng)

自適應(yīng)性飼養(yǎng)結(jié)束后,開(kāi)始給予大鼠高脂飼料喂養(yǎng),持續(xù)4周。期間密切觀察大鼠的飲食、活動(dòng)及體重變化



3. 注射造模

在高脂飼料喂養(yǎng)的第4周,大鼠腹腔注射1%STZ溶液,劑量為30mg/kg(3ml/kg),連續(xù)3天同一時(shí)間注射。STZ可選擇性破壞胰島β細(xì)胞,導(dǎo)致胰島素分泌不足


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4. 造模后護(hù)理

注射完成后,降低飼養(yǎng)密度以減少應(yīng)激反應(yīng),每天更換新鮮飲用水,保證充足的水分?jǐn)z入,及時(shí)補(bǔ)充飼料,維持良好的營(yíng)養(yǎng)狀態(tài),提高墊料更換頻率,保持環(huán)境清潔干燥,若進(jìn)行注射、采血、手術(shù)等侵入性操作,務(wù)必嚴(yán)格遵守?zé)o菌原則,確保操作前后嚴(yán)格消毒


5. 模型評(píng)價(jià)

在造模完成后的一段時(shí)間內(nèi)(通常為數(shù)周至數(shù)月),定期檢測(cè)大鼠的空腹血糖、餐后血糖、胰島素水平等指標(biāo),以評(píng)估模型的成功與否及病情進(jìn)展


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注意事項(xiàng)



①實(shí)驗(yàn)過(guò)程中需嚴(yán)格遵守動(dòng)物福利和倫理原則,盡量減輕動(dòng)物的痛苦和不適

②在數(shù)據(jù)分析時(shí)應(yīng)充分考慮模型的局限性,并結(jié)合其他研究手段綜合判斷

③及時(shí)記錄實(shí)驗(yàn)過(guò)程中的所有數(shù)據(jù),以便后續(xù)分析和總結(jié)經(jīng)驗(yàn)教訓(xùn)



如有需要,請(qǐng)聯(lián)系我們~

主營(yíng)項(xiàng)目


1. 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

動(dòng)物飼養(yǎng)、疾病造模、行為學(xué)檢測(cè)、心功能、無(wú)創(chuàng)血壓、血常規(guī)、全自動(dòng)生化檢測(cè)等


2. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

CCK8/MTT、原代細(xì)胞分離、流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕、侵襲、遷移、EDU染色、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定株


3. 分子生物學(xué)

PCR檢測(cè)、熒光定量PCR、絕對(duì)定量PCR、端粒酶長(zhǎng)度、pull down、雙熒光素酶、SSR、SNP檢測(cè)等


4. 蛋白實(shí)驗(yàn)

WB、Co-IP、酵母雙雜


5. 病理實(shí)驗(yàn)

HE染色、免疫組學(xué)、電鏡


6. 生理生化實(shí)驗(yàn)

肝腎功能、抗氧化、免疫反應(yīng)等生理免疫指標(biāo);動(dòng)植物營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)、微量元素、重金屬、酶活等。


7. 多組學(xué)實(shí)驗(yàn)

基因組、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、蛋白組、代謝組、微生物多樣性、宏基因組、生信分析


8. 整體課題實(shí)驗(yàn)

方案設(shè)計(jì)、整體實(shí)驗(yàn)交付、標(biāo)書(shū)寫(xiě)作、論文潤(rùn)色、協(xié)助投稿



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康旭禾生物提供包括動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、分子實(shí)驗(yàn)、病理實(shí)驗(yàn)、流式檢測(cè)實(shí)驗(yàn)及論文翻譯、潤(rùn)色、投稿輔助等相關(guān)的各項(xiàng)服務(wù)。


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