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動物實驗模型構建——切口疼痛模型

瀏覽:252 發(fā)表時間:2025-07-30

大小鼠切口疼痛模型是研究術后急性及慢性疼痛機制、評估鎮(zhèn)痛藥物效果的重要工具。以下是基于現(xiàn)有研究的詳細總結:


01

常見切口疼痛模型類型


1.足底切口模型

· 模型特點:通過在大鼠或小鼠后肢足底制造標準化切口(通常長度1cm),模擬手術切口疼痛,引發(fā)機械痛超敏和自發(fā)痛行為。

· 應用:主要用于研究急性術后疼痛及慢性術后疼痛(CPSP)的轉化機制,如神經(jīng)損傷和炎癥反應。


2.皮膚/肌肉切口牽拉模型(SMIR)

· 模型特點:切開皮膚及肌肉后牽拉深層組織(如跖肌),模擬手術牽拉損傷,導致機械痛閾值持續(xù)降低(術后1-10天)。

· 應用:適用于評估術后慢性疼痛的長期影響及鎮(zhèn)痛藥物(如可樂定、右美托咪定)的劑量依賴性療效。


3.剖腹手術模型

· 模型特點:通過腹部切口引發(fā)術后內(nèi)臟疼痛及行為改變(如體重減輕、蔗糖偏好降低),但疼痛持續(xù)時間較短(24小時消失)。



02

模型構建方法


1. 足底切口模型(大鼠)

手術步驟:

① 麻醉:戊巴比妥鈉或異氟烷。

② 切口:足底外側緣作1cm縱行切口,切開皮膚、筋膜及肌肉,鈍性分離避免血管損傷,不縫合切口。

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(圖片來自于網(wǎng)絡,侵權即刪)


行為學評估:

① 機械痛閾值:使用Von Frey纖維絲刺激足底,記錄縮足反應閾值(術后1、3、7天檢測)。

② 熱痛閾值:熱板實驗(52-55℃)測量縮爪潛伏期。

微信圖片_2025-07-30_163924_125


2. 皮膚/肌肉切口牽拉模型(小鼠)


手術步驟:

①  麻醉:異氟烷或戊巴比妥鈉。

② 切口:皮膚及肌肉切開后牽拉深層組織(如跖?。p合皮膚。


行為學評估:

① 機械痛閾值:Von Frey測試顯示術后1天痛閾顯著降低,持續(xù)至10天后逐漸恢復。

② 條件性位置偏愛(CPP):評估藥物(如右美托咪定)對自發(fā)痛的改善效果。



03

模型特點與注意事項


1.優(yōu)勢:

· 可重復性強,能穩(wěn)定模擬臨床術后疼痛特征。

· 結合行為學與生化指標(如IL-1β、TNF-α),揭示炎癥與神經(jīng)損傷機制。


2.局限性:

· 切口長度、麻醉時間等操作細節(jié)可能影響結果穩(wěn)定性。

· 熱痛閾值在部分模型中無顯著變化,需結合多指標評估。








文獻案例


【文章題目】

預先鞘內(nèi)給予新斯的明對切口疼痛大鼠的影響

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【文獻摘要】


目的:探討預先鞘內(nèi)給予新斯的明對切口疼痛大鼠行為學的影響。

方法:①采用序貫法測定預先鞘內(nèi)給予新斯的明對切口疼痛大鼠鎮(zhèn)痛作用的 ED50 值;② 預先鞘內(nèi)給予新斯的明對切口疼痛大鼠痛行為學的影響;③運用免疫組化技術觀察新斯的明對脊髓背角 c-fos 基因表達的影響。

結果:①預先鞘內(nèi)給予新斯的明對切口疼痛大鼠鎮(zhèn)痛作用的 ED50 值為 8. 36 μg,95% 可信區(qū)間為 6. 68 ~ 10. 70μg;②手術組大鼠累積疼痛評分明顯高于 F 組,預先 IT 新斯的明可明顯降低術后疼痛引起的累積疼痛評分;③與 S 組相比,新斯的明 ED50 量明顯抑制 c-fos 蛋白的表達,作用主要產(chǎn)生在Ⅰ ~ Ⅱ?qū)?、?~ Ⅵ層,以Ⅰ ~ Ⅱ?qū)臃植甲疃唷?/p>

結論:①預先新斯的明 5 ~ 15μg 鞘內(nèi)應用可產(chǎn)生劑量依賴性的抗傷害作用;②預先鞘內(nèi)注射新斯的明的抗傷害作用與抑制 c-fos 蛋白的表達有關。




主營項目


1. 動物實驗

動物飼養(yǎng)、疾病造模、行為學檢測、心功能、無創(chuàng)血壓、血常規(guī)、全自動生化檢測等


2. 細胞實驗

CCK8/MTT、原代細胞分離、流式細胞實驗、細胞劃痕、侵襲、遷移、EDU染色、轉染、穩(wěn)定株


3. 分子生物學

PCR檢測、熒光定量PCR、絕對定量PCR、端粒酶長度、pull down、雙熒光素酶、SSR、SNP檢測等


4. 蛋白實驗

WB、Co-IP、酵母雙雜


5. 病理實驗

HE染色、免疫組學、電鏡


6. 生理生化實驗

肝腎功能、抗氧化、免疫反應等生理免疫指標;動植物營養(yǎng)指標、微量元素、重金屬、酶活等。


7. 多組學實驗

基因組、轉錄調(diào)控、蛋白組、代謝組、微生物多樣性、宏基因組、生信分析


8. 整體課題實驗

方案設計、整體實驗交付、標書寫作、論文潤色、協(xié)助投稿



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