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研究小鼠焦慮行為的方法有很多，其中行為學(xué)實(shí)驗(yàn)之高架十字迷宮任務(wù)是一種評(píng)估嚙齒動(dòng)物類(lèi)焦慮行為比較經(jīng)典的一種方法。

該測(cè)試是在具有兩個(gè)張開(kāi)和兩個(gè)閉合臂的加號(hào)形裝置上進(jìn)行的，正式實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)，允許動(dòng)物自由探索迷宮5分鐘，同時(shí)記錄進(jìn)入張開(kāi)和閉合臂的持續(xù)時(shí)間和頻率。

該任務(wù)基于一種接近—回避沖突，這意味著該動(dòng)物面臨著探索新環(huán)境的傾向與對(duì)高處和開(kāi)放空間的無(wú)條件恐懼之間的斗爭(zhēng)。因此，與對(duì)照動(dòng)物相比，類(lèi)似焦慮狀態(tài)的特征是張開(kāi)臂回避增加。

設(shè)施準(zhǔn)備

1.高架十字迷宮

2.工業(yè)相機(jī)（放置在迷宮正上方）

3.間接白光

4.數(shù)字照度計(jì)

5.動(dòng)物行為學(xué)分析軟件

實(shí)驗(yàn)方法

1. 迷宮所處位置應(yīng)遠(yuǎn)離噪音、氣味等外來(lái)干擾。您可以選擇在行為實(shí)驗(yàn)室內(nèi)放置一個(gè)低強(qiáng)度白噪聲源，來(lái)緩解小鼠的焦慮。引導(dǎo)線索，例如房間周?chē)鷫Ρ谏系膱D畫(huà)，可能會(huì)使動(dòng)物的活動(dòng)偏向迷宮的某個(gè)區(qū)域。因此，必須移除任何可能用作提示的繪畫(huà)或人工制品。實(shí)驗(yàn)者在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中不要發(fā)出任何過(guò)度的噪音或移動(dòng)，也不要產(chǎn)生刺激性氣味，因?yàn)樗赡軐?duì)小鼠產(chǎn)生焦慮刺激。

2. 房間內(nèi)的照明必須保持恒定并根據(jù)要執(zhí)行的分析進(jìn)行控制。鑒于低強(qiáng)度光度會(huì)減少?gòu)堥_(kāi)臂的回避，而抗焦慮效果應(yīng)該在更高強(qiáng)度的照明下進(jìn)行，所以要根據(jù)不同的分析目的選擇對(duì)應(yīng)的強(qiáng)度照明。

3. 將這些實(shí)驗(yàn)條件調(diào)整至標(biāo)準(zhǔn)后，動(dòng)物將被帶入實(shí)驗(yàn)室，在籠中放置45至60分鐘，讓其從移動(dòng)的應(yīng)激中恢復(fù)。

4 在開(kāi)始測(cè)試之前，用70%乙醇清潔迷宮，以清除設(shè)備上積聚的任何污垢或氣味。

5. 打開(kāi)攝像機(jī)，將第一只小鼠放在迷宮的中心正方形中，面對(duì)一個(gè)張開(kāi)的臂，最好是與實(shí)驗(yàn)者相對(duì)的那個(gè)。

6. 實(shí)驗(yàn)者將站在離迷宮盡可能遠(yuǎn)的地方，并在實(shí)驗(yàn)動(dòng)物看不見(jiàn)的地方， 如有必要，站在房間外面。

7. 自由探索5分鐘后，老鼠會(huì)被移出迷宮并回到它的籠子里。

8. 清除所有尿液和糞便，并用70%乙醇徹底清潔迷宮，以去除第一只小鼠的任何殘留氣味。之后，可以將下一只小鼠提交給測(cè)試。

9. 重復(fù)步驟 5-8，直到所有動(dòng)物都經(jīng)過(guò)測(cè)試。

10. 錄制的視頻可以通過(guò)自動(dòng)計(jì)算機(jī)軟件進(jìn)行分析。

分析參數(shù)

1.進(jìn)入閉合臂中的條目和閉合臂中花費(fèi)的時(shí)間：整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中迷宮上總運(yùn)動(dòng)的測(cè)量。

2.進(jìn)入張開(kāi)雙臂的條目和張開(kāi)雙臂花費(fèi)的時(shí)間：可用作焦慮的逆向測(cè)量，也就是說(shuō)，減少?gòu)堥_(kāi)雙臂回避反映了較低水平的焦慮。

3.風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估行為：低頭的頻率、持續(xù)時(shí)間（進(jìn)入張開(kāi)雙臂時(shí)頭部向地板向下移動(dòng)）和伸展姿勢(shì)（頭部伸展姿勢(shì)，兩只或三只爪子放在張開(kāi)的臂上， 退回到以前的位置）可以直接衡量焦慮，即風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估行為的增加表明焦慮水平較高。

4.如果小鼠在測(cè)試過(guò)程中從張開(kāi)的臂上掉下來(lái)，實(shí)驗(yàn)者必須立即將其撿起并放回張開(kāi)的臂上。在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)分析時(shí)應(yīng)注意并考慮這一點(diǎn)，這種動(dòng)物可以從最終分析中排除。

5.只有當(dāng)動(dòng)物將四只爪子都放在中心方塊外并放在其中一個(gè)臂上時(shí)，才會(huì)考慮進(jìn)入張開(kāi)或閉合的臂。然而，從給定的臂伸出兩只爪子，已經(jīng)足以停止計(jì)算在臂上花費(fèi)的時(shí)間。如果動(dòng)物用這兩只爪子返回臂，則應(yīng)繼續(xù)計(jì)時(shí)，但不會(huì)記錄任何條目。

結(jié)果與討論

1.小鼠焦慮行為分析

小鼠在高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)中的表現(xiàn)可以反映其對(duì)不同環(huán)境的適應(yīng)能力。一般情況下，小鼠會(huì)傾向于在封閉臂中逗留，因?yàn)檫@里提供了視覺(jué)遮蔽，使其感到安全。相反地，開(kāi)放臂暴露在外，容易導(dǎo)致小鼠產(chǎn)生焦慮。因此，通過(guò)觀察小鼠在開(kāi)放臂和封閉臂中的行為表現(xiàn)，可以初步評(píng)估它們的焦慮水平。

2.小鼠抑郁行為分析

除了焦慮行為外，高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)還可用于評(píng)估小鼠的抑郁行為。抑郁行為常表現(xiàn)為對(duì)原本富有探索性的環(huán)境失去興趣。在實(shí)驗(yàn)中，通過(guò)觀察小鼠在高架十字迷宮中的活動(dòng)頻率、行動(dòng)速度和總距離等指標(biāo)，可以反映出其抑郁程度。例如，若小鼠在迷宮中表現(xiàn)出較低的活動(dòng)水平，可能表明其存在抑郁傾向。

3.藥物或遺傳干預(yù)的作用

在神經(jīng)生物學(xué)領(lǐng)域，高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)常被用于評(píng)估藥物或遺傳干預(yù)對(duì)小鼠焦慮和抑郁行為的影響。通過(guò)比較實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組之間的行為差異，可以揭示藥物或基因操作在緩解焦慮或抑郁癥狀方面的潛在效果。這對(duì)藥物篩選和遺傳研究具有重要意義。

4.實(shí)驗(yàn)條件對(duì)結(jié)果的影響

需要注意的是，實(shí)驗(yàn)條件對(duì)高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)的結(jié)果有很大影響。例如，環(huán)境光照、噪聲、氣味等都可能影響到小鼠的行為表現(xiàn)。因此，在設(shè)計(jì)和進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，必須嚴(yán)格控制這些變量，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

結(jié)論

高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)是一種有效的評(píng)估小鼠焦慮和抑郁行為的動(dòng)物行為學(xué)方法。通過(guò)對(duì)藥物或遺傳干預(yù)前后小鼠行為的評(píng)估，高架十字迷宮實(shí)驗(yàn)已廣泛應(yīng)用于神經(jīng)生物學(xué)領(lǐng)域。然而，仍需注意實(shí)驗(yàn)條件對(duì)結(jié)果的影響，以確保研究的可靠性。

主營(yíng)項(xiàng)目

1. 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

動(dòng)物飼養(yǎng)、疾病造模、行為學(xué)檢測(cè)、心功能、無(wú)創(chuàng)血壓、血常規(guī)、全自動(dòng)生化檢測(cè)等

2. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

CCK8/MTT、原代細(xì)胞分離、流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕、侵襲、遷移、EDU染色、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定株

3. 分子生物學(xué)

PCR檢測(cè)、熒光定量PCR、絕對(duì)定量PCR、端粒酶長(zhǎng)度、pull down、雙熒光素酶、SSR、SNP檢測(cè)等

4. 蛋白實(shí)驗(yàn)

WB、Co-IP、酵母雙雜

5. 病理實(shí)驗(yàn)

HE染色、免疫組學(xué)、電鏡

6. 生理生化實(shí)驗(yàn)

肝腎功能、抗氧化、免疫反應(yīng)等生理免疫指標(biāo);動(dòng)植物營(yíng)養(yǎng)指標(biāo)、微量元素、重金屬、酶活等。

7. 多組學(xué)實(shí)驗(yàn)

基因組、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、蛋白組、代謝組、微生物多樣性、宏基因組、生信分析

8. 整體課題實(shí)驗(yàn)

方案設(shè)計(jì)、整體實(shí)驗(yàn)交付、標(biāo)書(shū)寫(xiě)作、論文潤(rùn)色、協(xié)助投稿

康旭禾生物提供包括動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、分子實(shí)驗(yàn)、病理實(shí)驗(yàn)、流式檢測(cè)實(shí)驗(yàn)及論文翻譯、潤(rùn)色、投稿輔助等相關(guān)的各項(xiàng)服務(wù)。

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