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性別區(qū)分

在實(shí)驗(yàn)操作中，準(zhǔn)確區(qū)分小鼠和大鼠的性別至關(guān)重要。主要依據(jù)以下特征進(jìn)行判斷：

1. 生殖器與肛門的距離：雄性小鼠和大鼠的生殖器與肛門距離較遠(yuǎn)，而雌性則較近。這一特征在幼齡仔鼠中尤為明顯，因?yàn)榇藭r(shí)它們的外生殖器尚未成熟。

2. 毛發(fā)覆蓋情況：雄性小鼠和大鼠在生殖器與肛門之間通常有毛發(fā)生長，形成一條明顯的毛帶；而雌性則無毛，呈現(xiàn)一條清晰的縱溝。

3. 乳頭的明顯程度：雌性小鼠和大鼠的乳頭相較于雄性更為突出和明顯。

4. 生殖器官特征：雄性陰莖朝向頭部方向突出，可通過輕輕擠壓包皮使其露出；雌性則可見閉合的陰道口，擠壓時(shí)亦可張開。

5. 外觀差異：在某些情況下，雄鼠可能體型稍大于雌鼠，但這一特征并非絕對(duì)，還受到品種、年齡和營養(yǎng)狀況等多種因素的影響。

對(duì)于新生仔鼠和成年鼠的性別區(qū)分，可分別參考以下建議：

① 新生仔鼠：主要依據(jù)外生殖器與肛門之間的距離進(jìn)行判斷，距離近者為雌性，遠(yuǎn)者為雄性。

② 成年鼠：雄性陰囊明顯可見；雌性陰道開口清晰，且乳頭明顯。

編號(hào)方法

為確保實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的準(zhǔn)確性，對(duì)小鼠和大鼠進(jìn)行編號(hào)是必要的。常用的編號(hào)方法包括染色法、耳孔法和剪趾法等。

1. 染色法：使用毛筆或棉簽蘸取不同顏色的化學(xué)藥品（如苦味酸或中性紅）涂染在小鼠特定部位的毛發(fā)上。編號(hào)次序遵循九分法原則，即先左后右、由前至后。此方法適用于短期實(shí)驗(yàn)，因染料易褪色。

2. 耳孔法：使用專用打孔器在小鼠耳朵上打孔或剪出不同的缺口，通過位置和孔數(shù)進(jìn)行標(biāo)記。一般右耳表示個(gè)位數(shù)，左耳表示十位數(shù)。對(duì)于黑色或棕色小鼠及裸鼠，可采用特殊編號(hào)方法。此方法同樣適用于短期實(shí)驗(yàn)，且需確保編號(hào)不對(duì)動(dòng)物生理或?qū)嶒?yàn)反應(yīng)產(chǎn)生影響。

3. 剪趾法：根據(jù)對(duì)新生小鼠前肢4趾和后肢5趾的切斷位置進(jìn)行編號(hào)。應(yīng)切斷一段趾骨以確保編號(hào)清晰持久。此方法常用于出生7天內(nèi)的小鼠，并需在小仔5-7日齡內(nèi)進(jìn)行斷趾。

抓拿與固定

正確的抓拿與固定方法是確保實(shí)驗(yàn)順利進(jìn)行的關(guān)鍵。

1. 小鼠：習(xí)慣用右手者，用右手抓住小鼠尾部中部提起，放在鼠籠鐵紗網(wǎng)上或粗糙物上。待小鼠向前掙脫時(shí)，用左手拇指和食指抓住其頸部皮膚，小指和掌部夾住尾部?？粘龅挠沂诌M(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。習(xí)慣用左手者則相反操作。注意避免抓拿尾尖以防斷裂。

2. 大鼠：習(xí)慣用右手者，戴上防護(hù)手套后，用右手抓住大鼠尾巴中部提起，左手按住背部皮膚。可使用手術(shù)臺(tái)固定大鼠四肢。空出的右手進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。習(xí)慣用左手者則相反操作。注意大鼠門齒較長，抓取時(shí)應(yīng)避免被咬傷。

采血方法

根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求和動(dòng)物福利原則選擇合適的采血方法至關(guān)重要。以下以小鼠和大鼠為例介紹幾種常用的采血方法：

1. 尾尖采血：將小鼠固定并暴露尾巴，浸泡在溫水中或擦拭酒精使血管充盈。用無菌手術(shù)刀快速剪去尾尖1-2mm，血液自然流出。此方法簡便易行，適用于多次少量采血。

2. 摘眼球采血：抓取小鼠頸部頭皮并固定尾巴，輕壓眼部皮膚使眼球充血突出。剪去胡須后，用眼科彎鑷夾取眼球并快速摘取，使血液流入EP管中。此方法適用于需要大量血液樣本的實(shí)驗(yàn)。

3. 眼眶靜脈叢采血：適用于多次重復(fù)采血。無需麻醉，但需注意不能采集到無菌血樣。采血后需給予組織修復(fù)時(shí)間。

4. 心臟采血：將小鼠麻醉后仰臥固定于動(dòng)物臺(tái)上，剪去胸前區(qū)被毛并消毒皮膚。使用注射器在左側(cè)第3-4肋間心搏動(dòng)最強(qiáng)處進(jìn)針刺入心臟獲取血液樣本。此方法較為復(fù)雜且對(duì)動(dòng)物傷害較大。

5. 頸靜脈采血：無需麻醉，直接從穿刺點(diǎn)進(jìn)針采集血液。要求操作者技術(shù)嫻熟且需確保動(dòng)物固定良好以避免掙扎。

6. 隱靜脈采血：常用于少量血液采集且無需麻醉。剃毛后暴露采血點(diǎn)并用采血針刺入即可獲得血液樣本。

7. 頜下靜脈叢采血：快速、簡單且人性化的小鼠采血方法。通過面部進(jìn)針點(diǎn)采集血液，將對(duì)動(dòng)物的影響降到最低。

注意事項(xiàng)：

① 操作應(yīng)迅速、輕柔以避免對(duì)動(dòng)物造成不必要的傷害。

② 采血前后需進(jìn)行適當(dāng)?shù)闹寡胧┮苑乐钩鲅^多。

③ 尾尖在長期反復(fù)取血的情況下應(yīng)逐漸向近心端穿刺。

④ 盡量在滿足實(shí)驗(yàn)要求的基礎(chǔ)上選擇簡單易行且對(duì)動(dòng)物傷害較小的采血方法。

處死方法

處死小鼠和大鼠時(shí)需遵循動(dòng)物福利原則并確保操作規(guī)范。常用的處死方法包括頸椎脫臼法和二氧化碳窒息法等。

1. 頸椎脫臼法：先將大、小鼠麻醉后提起尾巴根部并放在粗糙面上固定枕寰關(guān)節(jié)。用力拉向后上方使枕寰關(guān)節(jié)脫臼導(dǎo)致脊髓與腦干斷離從而迅速死亡。此方法簡便易行且對(duì)動(dòng)物傷害較小。

2. 二氧化碳窒息法：將小鼠或大鼠放入盛有二氧化碳?xì)怏w的密閉容器中通過替換氧氣達(dá)到窒息效果。需確保容器干凈透明并裝有通氣孔以及提供適應(yīng)低氧環(huán)境的空氣或氧氣。持續(xù)增加CO?濃度直至達(dá)到100%并確保動(dòng)物在引起疼痛之前已失去意識(shí)。給藥后觀察動(dòng)物反應(yīng)并確認(rèn)死亡。此方法使用簡便、危害小且成本低廉但不適用于大型動(dòng)物。

在進(jìn)行以上所有操作時(shí)，務(wù)必確保人身和動(dòng)物的安全，遵循動(dòng)物福利原則并盡量減少對(duì)動(dòng)物的傷害和痛苦。

如有實(shí)驗(yàn)技術(shù)問題，可咨詢我們

電話：15579126092  

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主營項(xiàng)目

1. 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)

動(dòng)物飼養(yǎng)、疾病造模、行為學(xué)檢測(cè)、心功能、無創(chuàng)血壓、血常規(guī)、全自動(dòng)生化檢測(cè)等

2. 細(xì)胞實(shí)驗(yàn)

CCK8/MTT、原代細(xì)胞分離、流式細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞劃痕、侵襲、遷移、EDU染色、轉(zhuǎn)染、穩(wěn)定株

3. 分子生物學(xué)

PCR檢測(cè)、熒光定量PCR、絕對(duì)定量PCR、端粒酶長度、pull down、雙熒光素酶、SSR、SNP檢測(cè)等

4. 蛋白實(shí)驗(yàn)

WB、Co-IP、酵母雙雜

5. 病理實(shí)驗(yàn)

HE染色、免疫組學(xué)、電鏡

6. 生理生化實(shí)驗(yàn)

肝腎功能、抗氧化、免疫反應(yīng)等生理免疫指標(biāo);動(dòng)植物營養(yǎng)指標(biāo)、微量元素、重金屬、酶活等。

7. 多組學(xué)實(shí)驗(yàn)

基因組、轉(zhuǎn)錄調(diào)控、蛋白組、代謝組、微生物多樣性、宏基因組、生信分析

8. 整體課題實(shí)驗(yàn)

方案設(shè)計(jì)、整體實(shí)驗(yàn)交付、標(biāo)書寫作、論文潤色、協(xié)助投稿

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康旭禾生物提供包括動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、分子實(shí)驗(yàn)、病理實(shí)驗(yàn)、流式檢測(cè)實(shí)驗(yàn)及論文翻譯、潤色、投稿輔助等相關(guān)的各項(xiàng)服務(wù)。

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