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干貨：細(xì)胞培養(yǎng)保姆級(jí)實(shí)戰(zhàn)攻略

干貨：細(xì)胞培養(yǎng)保姆級(jí)實(shí)戰(zhàn)攻略細(xì)胞是生物細(xì)胞學(xué)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)，藥物、基因功能、疾病機(jī)理等的相關(guān)研究多數(shù)需要在細(xì)胞水平進(jìn)行闡釋。而細(xì)胞培養(yǎng)，受人員操作和環(huán)境條件的影響比較大，在細(xì)胞培養(yǎng)中常常會(huì)遇到很多的細(xì)節(jié)問題，而每個(gè)問題都有可能導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)的失敗。我們匯總了細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室多年來的細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)分享給大家，希望能給大家的細(xì)胞培養(yǎng)提供參考。01細(xì)胞系身份需明確 我們之所以選定某種細(xì)胞系開展實(shí)驗(yàn)，是因?yàn)樗x細(xì)胞系的一些特性符合研究方向的設(shè)定。比如組織特性，疾病特性，…

探尋分子生物學(xué)的那些事

引言隨著生命科學(xué)研究的深入，研究技術(shù)的革新與進(jìn)步，我們認(rèn)識(shí)了蛋白質(zhì)和DNA等生物大分子，我們也能深入研究這些生物大分子的結(jié)構(gòu)及其作用。研究生物分子結(jié)構(gòu)和功能的常見技術(shù)包括聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)、分子印跡雜交技術(shù)、酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)、免疫沉淀技術(shù)、RNA干擾技術(shù)以及組學(xué)技術(shù)。本期欄目讓我們一起走近探尋生物分子的那些事，了解分子生物學(xué)的基本原理。聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）是一種用于放大擴(kuò)增特定的DNA片段的分子生物學(xué)技術(shù)。其基本原理是利用DNA在體外加熱至95°高溫時(shí)變性會(huì)變成單…

蛋白實(shí)驗(yàn)干貨-蛋白提取-蛋白定量-實(shí)驗(yàn)步驟-問題處理

一、 產(chǎn)品用途 一、WB實(shí)驗(yàn)介紹 “ Western Blot WB（Western Blot，蛋白免疫印跡）是一種常規(guī)的蛋白分析技術(shù)，常用于鑒定某種蛋白，并能對(duì)蛋白進(jìn)行定性和半定量分析。WB實(shí)驗(yàn)的基本核心理念是抗原抗體的特異性反應(yīng)，通過變性膠 SDS-PAGE 將不同分子量的蛋白質(zhì)分離開，然后轉(zhuǎn)移到固相載體 PVDF 膜上，再用脫脂牛奶作為封閉液進(jìn)行封閉和一抗稀釋液進(jìn)行稀釋。待目的蛋白和抗體充分結(jié)合后，用 TBST 洗脫液洗脫掉多余未結(jié)合的一抗，加入帶有 HRP 標(biāo)記的對(duì)應(yīng)二抗，這樣，我們的蛋…

病理實(shí)驗(yàn)

提起病理，相信大家都不會(huì)感到陌生，對(duì)于眾多生命科學(xué)的科研工作者來說，病理學(xué)在科研工作中更是扮演著重要的角色。今天小編就為大家梳理一下在科研工作中常用到的病基本介紹病理學(xué)從研究對(duì)象區(qū)分，可以分為人體病理學(xué)和實(shí)驗(yàn)病理學(xué)，作為科研工作者，實(shí)驗(yàn)病理學(xué)是我們研究的主要方向。實(shí)驗(yàn)病理學(xué)以實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型、體外培養(yǎng)細(xì)胞、組織和器官為研究對(duì)象。動(dòng)態(tài)的研究人體疾病的發(fā)生發(fā)展規(guī)律。實(shí)驗(yàn)病理學(xué)的整體技術(shù)小編歸納為兩大類，一是制片技術(shù)、另一是染色技術(shù)。下面將從這兩個(gè)方向?yàn)榇蟆?/p>

【全網(wǎng)最全】實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生理生化指標(biāo)參考

實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生理生化—— Physiology and Biochemistry ——實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生理生化數(shù)據(jù)對(duì)于評(píng)估實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的器官功能或損傷改變情況起著決定性或提示性作用。小編搜集了很多信息，整理了一份關(guān)于常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物相關(guān)指標(biāo)的干貨內(nèi)容，具體如下：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物臟器重量值表(臟器均為%) 常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物生理指標(biāo)Animal physiological indicators常用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物基本信息Basic information of animals實(shí)驗(yàn)動(dòng)物排便排尿量表Animal defecation and urination scale實(shí)驗(yàn)動(dòng)物飼料量、飲水量、產(chǎn)熱量表Heat generation m…

精彩回顧|江西省生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)成立40周年紀(jì)念大會(huì)議圓滿落幕

2024年7月5日-8日，為慶祝江西省生物化學(xué)與分子生物學(xué)會(huì)成立四十周年，回顧學(xué)會(huì)發(fā)展歷史，弘揚(yáng)科學(xué)家精神，探討發(fā)展生產(chǎn)力，搭建會(huì)員交流平臺(tái)，展示江西省生化與分子生物學(xué)學(xué)科成果在江西九江隆重舉辦，邀請(qǐng)了多位行業(yè)重量級(jí)嘉賓，匯集了科研院所、醫(yī)療機(jī)構(gòu)、科研儀器設(shè)備、生物技術(shù)和服務(wù)企業(yè)等權(quán)威專家與產(chǎn)業(yè)先鋒等多名參會(huì)人員。康旭禾生物受邀參加本次大會(huì)，并帶來動(dòng)物實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞實(shí)驗(yàn)、分子實(shí)驗(yàn)、病理實(shí)驗(yàn)、流式檢測實(shí)驗(yàn)等相關(guān)的各項(xiàng)技術(shù)服務(wù)整體解決方案等最新產(chǎn)品技術(shù)，引起眾多…

如何不被實(shí)驗(yàn)室當(dāng)“韭菜”！如何選擇靠譜的實(shí)驗(yàn)室外包公司?

國家對(duì)于科學(xué)研究越來越重視，醫(yī)生以及科研工作者可以獲得更多相關(guān)實(shí)驗(yàn)課題的資助，國內(nèi)的科研環(huán)境也是越來越好，對(duì)于科研實(shí)驗(yàn)以及科研工作者自身素質(zhì)要求也越來越高，礙于很多科研工作者工作單位基礎(chǔ)設(shè)施不完善、臨床工相關(guān)教學(xué)工作任務(wù)繁重，無暇顧及自身科研課題，實(shí)驗(yàn)外包行業(yè)由此誕生。對(duì)于國內(nèi)的工作者來說，實(shí)驗(yàn)外包行業(yè)可能是一個(gè)新興的行業(yè)，對(duì)于國外的科研工作者，早已屢見不鮮，在五六十年代，實(shí)驗(yàn)外包行業(yè)在國外已經(jīng)興起。我國的實(shí)驗(yàn)外包行業(yè)雖然起步較晚，但是發(fā)展迅速，…

火熱的多組學(xué) ?

多組學(xué)是什么？ 多組學(xué)(Multi-Omics)，也稱為集成組學(xué)、泛組學(xué)和跨組學(xué)，旨在整合兩個(gè)或多個(gè)組學(xué)數(shù)據(jù)集，進(jìn)行數(shù)據(jù)分析、可視化和解釋，以明確某種生物過程的機(jī)制。是一種探究機(jī)體多種物質(zhì)相互作用的一種方法，目前包括基因組學(xué)、表觀基因組學(xué)、轉(zhuǎn)錄組學(xué)、蛋白質(zhì)組學(xué)、代謝組學(xué)、微生物組學(xué)等。 常見組學(xué)概念 1基因組學(xué)基因組學(xué)（genomics）的概念最早于1986年由美國遺傳學(xué)家Thomas H. Roderick提出?；蚪M學(xué)是對(duì)生物體所有基因進(jìn)行集體表征、定量研究及不同基因組比較研究的一門交…

動(dòng)物造模，該怎樣選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物？

動(dòng)物造模，該怎樣選擇實(shí)驗(yàn)動(dòng)物？實(shí)驗(yàn)不選什么動(dòng)物催吐實(shí)驗(yàn)不選用大小鼠，因?yàn)樾?大鼠無嘔吐反應(yīng) 膽囊功能實(shí)驗(yàn)不選用大鼠，因?yàn)榇笫鬅o膽囊發(fā)汗中藥的研究不能選用小鼠(無汗腺)慢性支氣管炎的實(shí)驗(yàn)不能選用大/小鼠，因?yàn)樾?大鼠氣管及支氣管腺不發(fā)達(dá)

糟心的實(shí)驗(yàn)做不來怎么辦？實(shí)驗(yàn)外包真香

糟心的實(shí)驗(yàn)做不來怎么辦？實(shí)驗(yàn)外包真香對(duì)于實(shí)驗(yàn)來說，方案才是精髓和核心價(jià)值，會(huì)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)方案，分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果的是大佬，會(huì)做實(shí)驗(yàn)的，那是實(shí)驗(yàn)員。所以，找靠譜的科研機(jī)構(gòu)外包實(shí)驗(yàn)，已經(jīng)是大勢所趨.什么情況下可以選擇實(shí)驗(yàn)外包？?實(shí)驗(yàn)耗時(shí)非常多，周期較長，這時(shí)候就可以將不重要耗時(shí)的實(shí)驗(yàn)外包出去，從而加快我們整體實(shí)驗(yàn)的進(jìn)度；需要迅速完成課題的，那么整體性外包是很適合的，可以在短時(shí)間完成實(shí)驗(yàn)獲取實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)，得到SCI論文的寫作素材。?有些儀器在借不到的情況下，使用頻率不高…

流式細(xì)胞周期檢測的那些問題

樣本制備注意事項(xiàng)1、根據(jù)不同的檢測細(xì)胞調(diào)整合適的溫度、濕度、酸堿度等培養(yǎng)環(huán)境，注意一定要無菌的環(huán)境培養(yǎng)。2、培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，以對(duì)數(shù)期處理為宜，避免細(xì)胞量過少導(dǎo)致收集細(xì)胞量不足或者細(xì)胞量過多導(dǎo)致細(xì)胞開始大量死亡造成的實(shí)驗(yàn)誤差。3、流式檢測細(xì)胞周期上機(jī)檢測所需收集細(xì)胞量較多，收集細(xì)胞時(shí)盡量多收集一些4、流式檢測對(duì)細(xì)胞離心，重懸次數(shù)較多，注意動(dòng)作輕緩，避免過多地?fù)p傷、弄破細(xì)胞。5、本實(shí)驗(yàn)對(duì)細(xì)胞離心，重懸次數(shù)較多，注意動(dòng)作輕緩，避免過多地?fù)p傷細(xì)胞。6、細(xì)胞周期待測…

免疫組化背景問題分析及解決方案！

1.蛋白質(zhì)疏水相互作用產(chǎn)生的背景在水性介質(zhì)中，當(dāng)大分子的表面張力低于水的表面張力時(shí)，就會(huì)發(fā)生疏水相互作用。疏水力是成功結(jié)合Ag-Ab的關(guān)鍵，但它們也會(huì)產(chǎn)生不可接受的背景。由于相鄰組織蛋白內(nèi)部和之間反應(yīng)性ε和α-氨基酸的交聯(lián)，通過與含醛固定劑固定，組織蛋白變得更疏水。固定過程中蛋白質(zhì)疏水性的增加增加了免疫組織化學(xué)程序中的背景染色;因此，應(yīng)避免長時(shí)間固定在福爾馬林或其他醛類固定劑中。這種過度固定引起的背景染色可以通過使用Bouin固定劑、Zenker固定劑或B5固定劑進(jìn)行…

細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)影響因素匯總

細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)是研究細(xì)胞在不同條件下的遷移能力的一種常用實(shí)驗(yàn)方法。以下是小編整理的關(guān)于細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)的注意事項(xiàng)：細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng)1．細(xì)胞處理在進(jìn)行細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)前，應(yīng)對(duì)需要檢測遷移能力的細(xì)胞進(jìn)行處理，如培養(yǎng)、傳代、酶消化等。同時(shí)還需注意控制每次處理時(shí)間和方法的一致性，以保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性。2. 細(xì)胞計(jì)數(shù)在進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)，應(yīng)精確計(jì)算每個(gè)實(shí)驗(yàn)組的細(xì)胞數(shù)。這可以通過顯微鏡下的視覺觀察或使用細(xì)胞計(jì)數(shù)儀來完成。正確的細(xì)胞計(jì)數(shù)可以幫助進(jìn)行實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和數(shù)據(jù)分析。3. 實(shí)驗(yàn)…

實(shí)驗(yàn)干貨 | qPCR實(shí)驗(yàn)中經(jīng)常忽略的實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)！

在實(shí)驗(yàn)室的日常實(shí)驗(yàn)中，每一個(gè)細(xì)節(jié)都可能對(duì)結(jié)果產(chǎn)生重要影響，尤其是在進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)實(shí)驗(yàn)時(shí)更是如此。繁忙的實(shí)驗(yàn)過程中，我們往往容易忽略一些看似微不足道但卻至關(guān)重要的步驟。因此，不妨讓我們一起回顧并重視那些常常被忽略的實(shí)驗(yàn)細(xì)節(jié)，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。01如何評(píng)判RNA質(zhì)量？評(píng)判RNA質(zhì)量是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中的一個(gè)關(guān)鍵步驟，尤其在涉及RNA測序、cDNA合成、qPCR等實(shí)驗(yàn)時(shí)，RNA的質(zhì)量直接影響到實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可靠性和準(zhǔn)確性。以下是評(píng)判RNA質(zhì)量的主要方法和步驟：…

?裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)分享

裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)經(jīng)驗(yàn)分享

是誰還分不清PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR！

是誰還分不清PCR、qPCR、RT-PCR、RT-qPCR！PCR、qPCR、RT-PCR和RT-qPCR這四種技術(shù)都是基于聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）的技術(shù)，但是它們之間存在一些區(qū)別。先來講講些四胞胎的概念：PCR：聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）是一種體外擴(kuò)增DNA分子的技術(shù)，利用DNA聚合酶和多個(gè)引物在所需溫度下擴(kuò)增目標(biāo)DNA分子。PCR反應(yīng)分為三個(gè)階段：預(yù)變性、變性-退火-延伸和延伸。PCR技術(shù)主要用于DNA序列的擴(kuò)增和檢測，應(yīng)用廣泛，如基因克隆、DNA序列測定等。qPCR：實(shí)時(shí)定量聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（qPCR）是一種實(shí)時(shí)檢測PCR過程…

生物實(shí)驗(yàn)小白必備：細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)步驟詳解

生物實(shí)驗(yàn)小白必備：細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)步驟詳解除了transwell外，我們還可以用細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)（cell ctratch test或wound healing assay）驗(yàn)證細(xì)胞遷移能力。1.培養(yǎng)板劃線標(biāo)記：通常隔0.5-1cm劃線，至少3條線；2.細(xì)胞鋪板：每孔接種5x105個(gè)細(xì)胞，數(shù)量可根據(jù)狀態(tài)調(diào)整，但一定要鋪勻（十字法或8字法）3.細(xì)胞劃線：200ul槍頭垂直橫線劃線，盡量保證力度一致；4.去除劃下細(xì)胞：PBS洗滌2-3次，然后換無血清或低血清培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞，根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康倪M(jìn)行藥物處理或其他；5.觀察與計(jì)數(shù)：放入37攝氏度5%CO…

康旭禾生物實(shí)驗(yàn)服務(wù)匯總

康旭禾生物實(shí)驗(yàn)服務(wù)匯總｜有找我做實(shí)驗(yàn)的嗎，在線等

1 2 3 為什么做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)需要分組

為什么做動(dòng)物實(shí)驗(yàn)需要分組1、統(tǒng)計(jì)學(xué)要求：在動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中，樣本量的大小對(duì)于實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性至關(guān)重要。統(tǒng)計(jì)學(xué)上要求一般至少每組有6個(gè)可用數(shù)據(jù)才有意義，這樣可以確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和可信度。然而，在某些特定的檢測（如檢測組織中基因或蛋白表達(dá)時(shí)），每組動(dòng)物數(shù)量在3到6只或以上即可滿足統(tǒng)計(jì)學(xué)分析要求。2、避免個(gè)體差異：每只動(dòng)物在遺傳、環(huán)境、生理等方面都可能存在差異，這些差異可能會(huì)影響到實(shí)驗(yàn)結(jié)果。通過分組并每組使用多只動(dòng)物，可以減少由于個(gè)體差異導(dǎo)致的實(shí)驗(yàn)誤差…

如何做好β-半乳糖苷酶染色！

結(jié)果β-半乳糖苷酶染色（β-Galactosidase Staining）是一種常用的細(xì)胞或組織活性檢測方法。這種染色方法基于衰老時(shí)SA-β-Gal（senescence-associated β-galactosidase）活性水平上調(diào)，可以對(duì)衰老細(xì)胞或組織進(jìn)行染色檢測。在普通的光學(xué)顯微鏡下就可以觀測到細(xì)胞或組織的衰老情況。不同類型樣本實(shí)驗(yàn)操作1. 細(xì)胞樣本染色1 貼壁細(xì)胞① 對(duì)于 6 孔板中培養(yǎng)的細(xì)胞，吸除細(xì)胞培養(yǎng)液，用 PBS 或 HBSS 洗滌 1 次，加入 1 ml 染色固定液，室溫固定 15 分鐘。② 吸除固定液，用 PBS 或 HBSS 洗滌…